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【求助】大家有用Top10表达含Trc启动子的质粒吗？
一含Trc启动子的质粒（该质粒之前是pET系列的，启动子是T7启动子，我用双酶切将T7启动子改为Trc启动子【参照pProExHTa】，RBS区域也改成了pProExHTa中的RBS，测序正确），转到Top10里加入IPTG后没有表达（T7启动子的时候该质粒在BL21里表达量很高）
不知道是质粒构建问题还是TOP10本身不可以作为表达菌株？
看过Top10的基因型，F－的，而Trc启动子是大肠杆菌内源RNA聚合酶可以识别的，所以理论上讲，加入IPTG就应该有表达的。
想问一下有没有做过类似试验的园友给介绍一下经验

你好，我使用pProEX HT系列载体做蛋白诱导表达，WB检测有目的条带，但无论如何优化表达条件，commas染色都没能得到高丰度表达的目的蛋白，请问您可否出现过这种情况？


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