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    糖苷酶亦称糖苷水解酶(glycoside hydrolase)。是用于各种糖苷或寡糖使糖苷键水解的总称。根据切割的糖的种类可分为内切糖苷酶(Endoglycosidase)和外切糖苷酶(Exoglycosidases)。内切糖苷酶是催化水解寡糖及多糖的内部糖苷键的酶,用于从糖蛋白上切割多糖的酶。其中内切糖苷酶F和内切糖苷酶H,可用于鉴别N-糖苷链的类型。内切糖苷酶F可断裂糖蛋白的天冬酰胺和甘露聚糖的糖苷键,内切糖苷酶H专一性水解两个N-乙酰氨基葡糖之间的 β(14)糖苷键,其底物主要是高甘露糖型和杂合型糖链。

    Prozyme提供了包括PNGaseF、Endo-H、Endo F2、PNGaseA、O-Glycanase等的内切糖苷酶。

    肽N- 糖苷酶 F,即 PNGase F,是一种酰氨酶,能够在N-连糖蛋白的高甘露糖、杂合和复合寡糖部分最内侧的N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)和天冬酰氨残基之间进行切割。

    糖苷内切酶H(Endo H)是从Streptomyces plicatus中克隆,在大肠杆菌中表达得到的重组糖苷酶。Endo H能够对N-糖蛋白中的高甘露糖和某些杂合型寡聚糖的壳二糖核心进行切割,而不切割复杂多糖。酶切反应切割寡糖二乙酰壳二糖核心的两个N-乙酰基葡糖胺残基,切割后保留天冬酰胺的一个N-乙酰葡糖胺残基。该特性与PNGase F(肽-N-糖苷酶 F)不同,它切割所有的天冬酰胺连接的寡糖。

    重组内切糖苷酶F2(Endo F2)适于切除天然状态下蛋白质的N连接寡糖,特别是复杂型的寡糖,核心岩藻糖对酶切效果影响不大。Endo F2酶切位点位于无糖核心的两个N乙酰氨基葡萄糖间的糖苷键,酶切后,释放出截短的游离寡糖,蛋白质天冬酰胺残基上仍保留一个N乙酰氨基葡萄糖。某些寡糖链,由于其所处位置受蛋白空间结构的影响,使用经典的PNGaseF无法在天然状态下将寡糖切除,须将蛋白进行变性处理。Endo F2与PNGaseF相比,对蛋白的空间结构的影响不敏感,因此更适合酶切天然状态下蛋白质的N连接寡糖。


    Prozyme提供的内切糖苷酶列表:

    产品类型

    产品名称

    产品编号

    规格

    PNGaseF

    N-Glycanase®

    GKE-5006A

    1 ea (100mU in 40 µl)

    N-Glycanase®

    GKE-5006B

    1 ea (200mU in 80 µl)

    N-Glycanase®

    GKE-5006D

    1 ea (1U in 400µl)

    N-Glycanase®-Ultra

    GKE-5020B

    1 ea (400mU in 40µl)

    N-Glycanase®-Ultra

    GKE-5020D

    1 ea (1U in 100µl)

    Glyko® N-Glycanase-PLUS

    GKE-5010B

    1 ea (400mU in 40µl)

    Glyko® N-Glycanase-PLUS

    GKE-5010D

    1 ea (1U in 100µl)

    Glyko® PNGase F (Chryseobacterium

    [Flavobacterium] meningosepticum)

    GKE-5003

    1 ea (100 mU (50 µl))

    Endo-H

    Glyko® Endoglycosidase H (recombinant gene

    from Streptomyces plicatus, expressed in E. coli)

    GKE-5002

    1 ea (30 mU (200 µl))

    Endo F2

    Glyko® Endo F2 (recomb Chryseobacterium

    [Flavobacterium] meningosepticum expressed

    in E. coli)

    GKE-5008

    1 ea (6 mU (60 µl))

    PNGaseA

    Glyko® PNGase A (almond)

    GKE-5011A

    1 ea (2mU)

    Glyko® PNGase A (almond)

    GKE-5011B

    1 ea (10mU)

    O-Glycanase

    Glyko® O-Glycanase (recombinant gene from

    Streptococcus pneumoniae, expressed in E.coli)

    GK80090

    1 ea (50 mU (40 µl))



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