avacta重组抗体专家,avacta使命是通过发展我们的一种特有Affimer安全和有效的药物来塑造医学的未来平台,并提供了强大的Affimer用于研究和诊断试剂
重组抗体表达是利用基因重组技术,将抗体序列转入表达载体并在表达系统中表达,终纯化得到重组抗体.相较于传统的抗体制备方法,利用基因重组技术表达抗体具有诸多优势
周期短:重组抗体生产周期为6~8周,而传统制备方法需4~6个月;
可控性高:抗体的基因是确定的,因此实验的重复性好且批次间差导小;
免疫原性低:不需要免疫动物,抗体不会产生鼠源性,不容易激起人体的免疫反应;
基因工程改造:利用基因重组技术,可以实现抗体片段的生产以及鼠源单抗的人源化改造。
Anti-HumanSUMO1AffimerReagent(HS1-A1)Biotinylated
抗人SUMO1Affimer试剂(HS1-A1)生物素化
目录代码AVA00024-
规格100g
Affimer(HS1-A1)到人力SUMO1生物素化
一般
名称抗人SUMO1Affimer试剂(HS1-A1)生物素化
目录代码AVA00024生物素
概观
克隆IDHS1-A1
尺寸(g)100
经测试的应用程序共免疫沉淀,ITC,WesternBlotting
标签C-term6His
共轭生物素化
属性
形成液体
存储说明短期使用,储存在4C。我们建议在-20C下长期等分和储存。Affimers通常不受3-4次冷冻/解冻循环的影响
缓冲100mM磷酸钠,75mM氯化钠,0.02%SodiumAzide,pH7.4
纯度95%
净化方法IMAC随后进行脱盐
克隆单克隆
目标
目标人类SUMO1
物种反应性人的
目标UniprotIDP63165
目标功能
泛素样蛋白质,可以作为单体或赖氨酸连接的聚合物共价附着在蛋白质上。通过异肽键与其底物的共价连接需要E1复合物SAE1-SAE2的预先活化和与E2酶UBE2I的连接,并且可以通过E3连接酶如PIAS1-4,RANBP2或CBX4促进。这种对蛋白质赖氨酸残基的翻译后修饰在许多细胞过程中起着至关重要的作用,例如核转运,DNA复制和修复,有丝分裂和信号转导。例如,涉及将RANGAP1靶向核孔复合蛋白RANBP2。聚合SUMO1链也易受多泛素化的影响,其作为蛋白酶体降解修饰蛋白的信号。也可能调节参与腭发育的基因网络。
Affimers的设计在许多方面比抗体表现更好。
研究领域CellSignaling,UPS
此Affimer仅在下面详述的应用程序中进行了测试。应用说明包括推荐的起始浓度,但是,宜条件应由终用户确定。
等温滴定量热法
克隆HS1-A1显示出对人SUMO1特异性(Kd=97nM),但通过等温滴定量热法与人SUMO2没有相互作用。
免疫共沉淀
用携带靶标(GFP,GFP-SUMO1或GFP-SUMO2)和Affimer(具有FLAG标签)的质粒(共)转染HEK293T细胞48小时。将细胞在PBS中洗涤,并将蛋白质在含有50mMTris(pH7.4),150mMNaCl,1%NP-40和1x蛋白酶抑制剂混合物(Roche)的1ml裂解缓冲液中在冰上提取15分钟,并通过在12,000℃离心澄清。xg10分钟,4C。将裂解物与GFP-Trap(Chromotek)一起温育,用于GFP标记物质的共免疫沉淀。免疫沉淀的蛋白质在Laemmli缓冲液中洗脱并进行免疫印迹分析。如标记但红色框,Affimer(HS1-A1)在GFP-SUMO1存在下共沉淀,但不存在GFP-SUMO2。
WesternBlotting
SDS-PAGE和印迹
在Bolt4-12%Bis-TrisPlus凝胶(LifeTech)上分离蛋白质样品(每孔100ng),并使用iBlot2(LifeTech)印迹到硝酸纤维素上。
闭塞
使用1xTBS+3%脱脂奶粉(1小时,RTC,400rpm)封闭膜
洗1
3x5ml的1xTBS-T(0.05%吐温-20)
Affimer孵化
1xTBS+3%脱脂奶粉中5g/ml(16h,4C,400rpm)
洗2
3x5ml的1xTBS-T(0.05%吐温-20)
发现
兔抗6xHisHRP结合物,在1xTBS+3%脱脂奶粉中1/5,000稀释(1小时,RTC,400rpm)
洗3
3x5ml的1xTBS-T(0.05%吐温-20)
基质
ECL(Amersham)
只有当Affimer存在时才会形成可检测的复合物:Affimer识别免疫球蛋白,并且通过Affimer上的6xHis标签介导复合物的检测。抗-6xHis结合剂不检测不存在Affimer的膜4上的IgG。
货号
品名
规格
品牌
AVA00109
Anti-IpilimumabAffimerReagentHA,6xHistag
100g
avacta
AVA00108
Anti-AdalimumabAffimerReagentHA,6xHistag
100g
avacta
AVA00107
Anti-RituximabAffimerReagentHA,6xHistag
100g
avacta
AVA00104
Anti-diUbiquitinK33AffimerReagent6xHistag,Cysteine
100g
avacta
AVA00106
Anti-TrastuzumabAffimerReagent6xHistag,Cysteine
100g
avacta
AVA00105
Anti-diUbiquitinK33AffimerReagentGFP,7xHistag
100g
avacta
AVA00103
Anti-diUbiquitinK33AffimerReagent6xHistag
100g
avacta
AVA00102
Anti-diUbiquitinK6AffimerReagentGFP,7xHistag
100g
avacta
AVA00101
Anti-diUbiquitinK6AffimerReagent6xHistag,Cysteine
100g
avacta
AVA00100
Anti-diUbiquitinK6AffimerReagent6xHistag
100g
avacta
AVA00026
Anti-HumanSUMO1/2AffimerReagent(HS-D5)
100g
avacta
AVA00025
Anti-HumanSUMO2AffimerReagent(HS2-B3)
100g
avacta
AVA00024-Biotin
Anti-HumanSUMO1AffimerReagent(HS1-A1)Biotinylated
100g
avacta
AVA00020
Anti-UbiquitinAffimerReagent(UX-K63-20)
100g
avacta
AVA00019
Anti-diUbiquitinK48-linkageAffimerReagent(36-28)
100g
avacta
AVA00018
Anti-diUbiquitinK48-linkageAffimerReagent(36-16)
100g
avacta
AVA00024
Anti-HumanSUMO1AffimerReagent(HS1-A1)
100g
avacta
AVA00022-Biotin
Anti-YeastSUMOAffimerReagent(YS1-15)Biotinylated
100g
avacta
AVA00022
Anti-YeastSUMOAffimerReagent(YS1-15)
100g
avacta
AVA00067-Biotin
Anti-GSTAffimerReagent(L4-B1)Biotinylated
100g
avacta
AVA00067
Anti-GSTAffimerReagent(L4-B1)
100g
avacta
AVA00068-Biotin
Anti-GSTAffimerReagent(L4-A2)Biotinylated
100g
avacta
AVA00068
Anti-GSTAffimerReagent(L4-A2)
100g
avacta
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