
传统的分子生物学技术甚至现代合成生物学技术都不允许在一个真核细胞中方便地组装和拆卸共表达载体,从而产生多种蛋白质。multibac表达系统使用DNA重组来实现昆虫细胞中多蛋白表达的杆状病毒载体的简单、高通量兼容构建。多蛋白共表达需要产生蛋白质复合物,如多价疫苗,或同一细胞中的多个单独蛋白质,如信号通路。多表达技术也是新兴合成生物学革命的基石。multibac平台已用于产生完整的信号转导途径,如gpcr信号级联、激酶级联和蛋白酶级联。MULTIBAC还被用于生产病毒样颗粒(VLP)和多种多蛋白复合物。杆状病毒表达载体系统(BEV),如multibac是生产蛋白激酶、gpcrs和用于药物发现的离子通道的前线技术平台,是作为基因治疗传递载体的一个重要领域。以杆状病毒为载体的昆虫细胞表达也越来越多地用于生物制药的生产。MULTIBAC转移载体是完全合成的,只包含功能性DNA,因此体积小且易于处理。multibac杆状病毒基因组(DH10Embacy)正在不断开发,以去除有害/非必需基因(如v-cath和chia)和DNA重组热点,并包含一个集成的荧光蛋白表达盒,以便于监测病毒滴度。MULTIBAC目前在全球1000多个学术和工业实验室使用。
TrADItionalmolecularBIOLOGytechnologiesandevenmodernsyntheticbiologytechnologiesdonotallowforconvenientmodularassemblyanddisassemblyofco-expressionvectorsforproductionofmultipleproteinsinasingleeukaryoticcell.TheMultiBacexpressionsystemusesDNArecombinationtoallowforeasy,high-throughputcompatIBLeconstructionofbaculovirusvectorsformultiproteinexpressionininsectcells.Multiproteincoexpressionisrequiredtoproduceproteincomplexes,suchasmultivalentvaccines,ormultipleindividualproteinsinthesamecell,suchasforsignalingpathways.Multiexpressiontechnologiesarealsothecornerstoneoftheemergingsyntheticbiologyrevolution.TheMultiBacplatformhasbeenusedforproductionofwholeintactsignaltransductionpathwayssuchasGPCRsignalingcascades,kinasecascades,andproteasecascades.MultiBachasalsobeenusedforproductionofviruslikeparticles(VLPs)andawidevarietyofmultiproteincomplexes.BaculovirusExpressionVectorSystems(BEVS)suchasMultiBacareafrontlinetechnologyplatformforproductionofproteinkinases,GPCRsandionchannelsfordrugdiscovery,andareamajorareaofinterestasdeliveryvectorsforgenetherapy.Insectcellexpressionusingbaculovirusasavectorisalsobecomingincreasinglyusedinmanufacturingofbiopharmceuticals.MultiBactransfervectorsarefullysynthetic,comprisingonlyfunctionalDNA,andasaresultaresmallandeasytohandle.TheMultiBacbaculovirusgenome(DH10EMBacY)isundercontinuousdevelopmenttoremoveharmful/non-essentialgenes(e.g.v-cathandchiA)andDNArecombinationhotspots,andcontainsanintegratedfluorescentproteinexpressioncassettetoallowforeasymonitoringofvirustiter.MultiBacispresentlyusedbyover1000academicandindustriallaboratoriesaroundtheworld.
