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Phos-tag磷酸化蛋白分析新方法--无需特意制备磷酸化抗体,可检测出...


Phos-tag 是一种能与磷酸离子特异性结合的功能性分子。它可用于磷酸化蛋白的分离(Phos-tag Acrylamide)、Western Blot检测(Phos-tag Biotin)、蛋白纯化 (Phos-tag Agarose)及质谱分析MALDI-TOF/MS (Phos-tag Mass Analytical Kit)。

◆ Phos-tag 的基本结构:

特点:
与-2价磷酸根离子的亲和性和选择性高于其它阴离子
在pH 5-8的生理环境下生成稳定的复合物

◆ 原理:

◆ 应用:

样品类型:

样品来源物种 无物种特异性,可用于人、植物(拟南芥 水稻 棉花等)、动物(斑马鱼 灵长类等)、微生物(酵母 细菌 真菌等) 昆虫(果蝇 蚕等)
各包装可做实验次数 2mg包装20μM可制约20块胶,50μM约8块;10mg包装20μM可制100块胶,50μM约40块
193-16711 SuperSepPhos-tag (50μmol/L),10%,13well
Phos-tag13孔10%预制胶
190-16721 SuperSepPhos-tag (50μmol/L),10%,17well
Phos-tag17孔10%预制胶
195-16391 SuperSepPhos-tag (50μmol/L),12.5%,13well
Phos-tag13孔12.5%预制胶
193-16571 SuperSepPhos-tag (50μmol/L),12.5%,17well
Phos-tag17孔12.5%预制胶
193-16691 SuperSepPhos-tag#8482;(50μmol/L),15%,13well
Phos-tag13孔15%预制胶
196-16701 SuperSepPhos-tag#8482;(50μmol/L),15%,17well
Phos-tag17孔15%预制胶
197-16851 SuperSepPhos-tag#8482;(50μmol/L),17.5%,13well
Phos-tag13孔17.5%预制胶
194-16861 SuperSepPhos-tag#8482;(50μmol/L),17.5%,17well
Phos-tag17孔17.5%预制胶
198-17981 SuperSep#8482;Phos-tag#8482;(50μmol/l),7.5%,17well,83×100×3.9mm
Phos-tag#8482;预制胶,BioRad型
195-17991 SuperSep#8482;Phos-tag#8482;(50μmol/l),12.5%,17well,83×100×3.9mm
Phos-tag#8482;预制胶,BioRad型
192-18001 SuperSep#8482;Phos-tag#8482;(50μmol/l),7.5%,17well,100×100×6.6mm
Phos-tag#8482;预制胶,LifeTechnologies型
199-18011 SuperSep#8482;Phos-tag#8482;(50μmol/l),12.5%,17well,100×100×6.6mm
Phos-tag#8482;预制胶,LifeTechnologies型

phos-tag#8482;由日本广岛大学研究生院医齿药学综合研究科医药分子功能科学研究室开发。
SuperSep Phos-tag#8482;是一种预制胶,预先加入了50 μmol/L的Phos-tag#8482; Acrylamide,打开包装即可直接使用。预制胶中含有锌作为金属离子,在中性凝胶缓冲液中保存稳定性很好,得到的结果条带也很整齐。


◆预制胶使用安全
◆可长期保存(6个月)
◆ 操作与普通SDS-PAGE一样

◆ 案例、应用:

电泳条件:30 mA(恒电流), 60分钟
样品:5 ug/Lane α-酪蛋白(含磷酸化与去磷酸化α-酪蛋白)(产品编号038-23221)
普通SDS-PAGE只观察到一条条带,而Phos-tag#8482; SDS-PAGE里可见α-酪蛋白磷酸化和α-酪蛋白去磷酸化两条条带。
样品缓冲液:Sample Buffer Solution (2ME+) (X4) (产品编号191-13272)
电泳缓冲液:SDS-PAGE 缓冲液, pH8.5(产品编号192-16801)
染色:QUICK CBB PLUS(产品编号174-00553)
P10%(左) : SuperSep Phos-tag#8482; (50 μmol/L), 10%, 13well
P15%(中) : SuperSep Phos-tag#8482; (50 μmol/L), 15%, 13well
A15%(右) : SuperSep#8482;Ace, 15%, 13well (不含Phos-tag#8482;)
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