紫色激光的明亮替代产品 Super Bright 系列染料

Invitrogen™eBioscience™SuperBright436染料的最大激发波长为414nm，发射峰为436nm。推荐使用450/50带通滤波器或等效滤波器，与Invitrogen™eFluor™450染料或Invitrogen™PacificBlue™染料近似。SuperBright436染料-偶联物抗体的亮度显著强于eFluor450染料偶联物，可替换BrilliantViolet™421偶联物，具有近似的阳性和阴性种群分辨率。稳定性研究显示当染色细胞暴露于甲醛固定剂长达三天或在未遮盖的情况下置于环境光线下过夜，SuperBright436染料仅有微小的荧光损失。

图1.SuperBright436染料性能比较。经Anti-Ly-6A/E（克隆号D7）APC染色的小鼠骨髓细胞以及分别与SuperBright436染料（左图）、eFluor450染料（中图）或BrilliantViolet421染料（右图）偶联的抗CD117（克隆号2B8）。

Invitrogen™eBioscience™SuperBright600染料是含有SuperBright436染料的串联染料，是发射波长为600nm的受体染料。可使用610/20带宽滤波器检测。与这种串联聚合物染料偶联的抗体在亮度上和BrilliantViolet™605染料偶联物具有可比性。SuperBright600染料偶联抗体储存在甲醛固定剂中时可稳定保存长达三天。

图2.多重流式细胞分析实验。在SuperBright染色缓冲液中稀释正常人外周血细胞，然后用所指示的试剂进行表面染色。活性细胞（使用可固定活性染料确定）被用于确定多种T细胞亚群的分析。

连同其他聚合物染料，当在同一实验中使用多种SuperBright染料偶联抗体时，可能发生非特异性染料间相互作用。当发生这一情况时，这些相互作用可能导致意外的种群迁移。在加入SuperBright偶联物前，使用SuperBright染色缓冲液（产品目录号SB-4400-42），以减少这一情况，将种群恢复到散点图中预期的位置。当联合其他聚合物染料（如BrilliantViolet染料）使用SuperBright染料时，可使用SuperBright染色缓冲液最大程度减少染料间相互作用。SuperBright染色缓冲液使用配方为5µL/次检测，方便在制备混合液时使用。

注意：SuperBrightStainingBufferisnotcompatIBLewithUltraCompeBeadsmicrospheres.

图3.SuperBright染色缓冲液减少非特异性聚合物染料相互作用。(A)人外周血液经抗CD8a（克隆号RPA-T8）SuperBright600染料和抗CD4（克隆号SK3）SuperBright436染料染色前，加入流式细胞分析染色缓冲液（顶部散点图）或SuperBright染色缓冲液（底部散点图）。(B)人外周血液经抗CD8a（克隆号SK1）BrilliantViolet605染料和抗CD4（克隆号SK3）SuperBright436染料染色前，加入流式细胞分析染色缓冲液（顶部散点图）或SuperBright染色缓冲液（底部散点图）。(C)人外周血液经抗CD8a（克隆号RPA-T8）SuperBright600染料和抗CD4（克隆号SK3）BrilliantViolet421染料染色前，加入流式细胞分析染色缓冲液（顶部散点图）或SuperBright染色缓冲液（底部散点图）。