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你研究牛的外泌体吗？如果没有，并且您在细胞或组织培养基中使用胎牛血清（FBS），则分离出的牛外泌体可能比您想象的要多。血清是外泌体的丰富来源，包括胎牛血清。为了帮助科学家仅研究他们想要的外泌体，SBI提供了Exo-FBS？外来体耗尽的胎牛血清。
外泌体大小的囊泡被去除
CD63阳性奶牛外泌体水平非常低
不可检测的牛microRNA水平
与标准FBS相当的增长率
与标准FBS相同（在DMEM或RPMI中添加10％）
背景
用于培养中大多数细胞的标准生长培养基需要FBS作为DMEM的生长补充。FBS来自牛（牛）血清，并且含有大量的牛外泌小泡。在标准培养条件下研究目标细胞分泌的外泌体时，这些外泌体可能会干扰或引起重大的背景问题。
SBI已开发出一种名为Exo-FBS的外泌体贫乏FBS生长补充剂，该补充剂已被剥离出牛外泌体。Exo-FBS支持培养中多种细胞的等价生长，不含牛CD63阳性外泌体，并且没有任何可测量的牛microRNA。Exo-FBS中的细胞生长与标准FBS相当。Exo-FBS的制造方法是专利号为：US9,005,888B2的专利方法。
结论
进行培养中细胞分泌的外泌体的研究时，无需担心实验中会污染牛的外泌体，并且使用ExoQuick-TC时无需超速离心。可作为标准FBS补充剂或热灭活的FBS培养基补充剂（在牛外泌体去除前于65°C处理15分钟）。
使用SBI的Exo-FBS确保来自细胞或组织培养基的外泌体制剂仅包含来自细胞的外泌体，而不包含来自培养基中FBS的外泌体。ELISA和NanoSight分析均表明，与标准FBS相比，Exo-FBS中的牛外泌体水平大大降低。
NanoSight颗粒分析显示Exo-FBS中的外泌体水平较低
为了证明我们Exo-FBS产品中外来体的消耗，我们将标准FBS和Exo-FBS样品按1：1000进行了稀释，然后使用NanoSightLM10仪器分析了粒径和丰度。标准FBS样品显示出大量的外泌体大小的微泡，其中Exo-FBS去除了外泌体的FBS样品显着减少了外泌体颗粒。
Exo-FBS耗尽了牛CD63外泌体
四跨膜蛋白CD63蛋白是外泌体的常见标记。我们利用牛特异性抗CD63抗体开发了一种酶联免疫吸附测定（ELISA）。在该ELISA分析中使用等体积（50μl）的标准FBS或Exo-FBS耗尽培养基补充剂。与标准FBS相比，Exo-FBS中CD63阳性牛外泌体的数量大大减少（绘制的结果已标准化为标准FBS的信号水平）。
通过将NanoSight颗粒计数分析与原始FBS，超离心18小时的FBS以及SBI消耗了外泌体的Exo-FBS产品进行比较，可以对SBI生产的每批Exo-FBS生成质量控制数据。所有样品均按1：100稀释，一式三份收集NTA数据。
结论
使用Exo-FBS，您可以确信所分离的外泌体是由培养中的细胞产生的，而不是来自培养基的污染物。
Exo-FBS不仅大大降低了外泌体的水平，而且高灵敏度qPCR分析也显示出Exo-FBS中的牛microRNA无法检测到。用Trizol提取方法处理标准FBS和Exo-FBS培养基补充剂（4ml），以回收外泌体RNA。将RNA转换为cDNA，并使用SBI的QuantiMir系统通过qPCR测量72个单独的牛microRNA。在测试的72个microRNA中，有12条在FBS样品中产生了扩增曲线，而在Exo-FBS样品中没有。
Exo-FBS不仅可以可靠地分离不含标准FBS中存在的污染物的外泌体，而且还支持与标准FBS相同的生长速率。
为了比较Exo-FBS与标准FBS中细胞的生长速率，我们在含有10％标准FBS或10％Exo的完全培养基中培养了HT1080纤维肉瘤细胞，PC-3前列腺癌细胞，MCF-7乳腺癌细胞和HEK293细胞。-FBS补充。将细胞接种在10,000或20,000个细胞中，然后在标准条件下于37°C在5％CO2中于指定培养基中培养5天。对细胞成像以计算生长速率并观察细胞形态。对于在这4种细胞系中测试的标准FBS和Exo-FBS培养基，观察到了同等的生长和类似的细胞形态。
