产品资料

PEI 23966-1 转染试剂



产品名称:polyscience23966-1线性聚乙烯亚胺(MW25,000)
产品英文名称:Polyethylenimine,Linear(PEI)
CAS号:9002-98-6,26913-06-4
产品包装:1g
产品价格:
有效期:一年


品牌:Polyscience
产地:USA
保存条件:
纯度规格:1g
产品类别:转染试剂


PEI转染手册

转染操作流程:
 
  1、细胞传代:

转染前24h内分离293T细胞至含10%胎牛血清的DMEM培养基中进行传代培养,接种密度如下:
        6孔板:0.5x106细胞
        10cm培养皿:4.0x106细胞
        15cm培养皿:9.0x106细胞

2、转染

转染前将所有试剂置于室温。

2.1质粒DNA的稀释

在无菌试管中,用无血清的DMEMW/O酚红培养基(浓度为10%)稀释质粒DNA(ug)。病毒包装体(psPAX2):病毒包膜(pMD2G)和重组质粒DNA的稀释比例分别为4:2:1。
       

6孔板:200ul+3ug的DNA
        10cm培养皿:1ml+7-8ug的DNA
        15cm培养皿:2ml+11-12ug的DNA

  2.2转染复合体形成

将PEI(1ug/uL)加入已稀释的总DNA中,PEI与DNA(ug)的混合比率为3:1。加入后立即涡旋混合。
      

 6孔板:9ulPEI复合体(1ug/ul)=9ug
        10cm培养皿:21ulPEI复合体(1ug/ul)=21ug
        15cm培养皿:33ulPEI复合体(1ug/ul)=33ug
将添加到细胞的DNA/PEI的混合物在室温下孵育15分钟。


4、收获转染细胞

转染后48小时内收获转染细胞/或病毒上清。
 
试剂的配制:
PEI(1ug/ul)polysciences(CAT#23966-2配制成储液:)
1、将无内毒素的无菌水加热至80℃左右溶解PEI,冷却到室温。
2、调整pH值至7.0,用0.22um的滤器过滤消毒,分装后储存在-20℃。工作液可保持在4℃


polyscience,inc,成立于1961年,起家于化学但超越化学领域的美国制造商,总部位于宾夕法尼亚州沃灵顿,公司业务主要涵盖三大块:1.实验用产品:a)成千上万种具品牌特色的化合物和试剂,应用于实验室研究,组织学,电镜和解剖病理学以及其他诊断和生命科学研究;b)种类极其宽广的单体和聚合体,满足各方研究领域;c)有机/无机化合物,生物可降解材料,磁珠,荧光素,染料和特定抗体,以及常规蛋白包被颗粒(直径范围40nm~10mm)的全球首要制造工厂;d)顶端多聚化合物的供货中心,满足各种高性能工业领域需求,包括替代能源,汽车电子,国防&航空电子,便携式通信和计算机,医疗器械组装。2.定制合成;3.cgmp生产服务。

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