Expedeon

Expedeon 公司是英国一家专注于生物偶联技术（bioconjugation）的企业。生物偶联即将两种分子结合在一起而形成一个杂合的偶联物（hybrid conjugate），这些偶联结合物（如标记抗体）在世界各大医院和科研机构被广泛使用。Expedeon 公司开发生产“一步法”抗体标记试剂盒-Lightning-Link™系列产品极大程度的简化了结合标记流程，是目前世界上操作最简便的抗体标记试剂盒。

在进行多因子检测时，我们往往因不能找到多种合适的标记一抗，而不得不选用标记二抗，因此很难避免可能发生的交叉反应及繁琐的洗涤步骤。Lightening-LinK™抗体标记试剂盒系列，提供多种荧光蛋白、酶及荧光素标记等产品，试验操作人员可直接应用于标记一抗，从而避免了因使用二抗带来的交叉反应及非特异性结合等问题。该系列试剂盒具有以下显著特点

*非共价连接的抗体标记物只能稳定30分钟

试剂盒组成
● 1或3(以规格而定)玻管Lightening-Link™ Mix 混合物。
● 1管LL-X（X为标记物，如PE或HRP等）修饰试剂。
● 1管LL-X萃灭试剂。

操作步骤
1）在每10ul抗体样品中加入1ul的LL-Modifier修饰试剂，轻轻混匀
2）打开Ligtening-Link混合物管盖，吸取步骤1已混好的抗体样品至管内冻干混合物中，用吸液器轻轻吸打1-2次,使粉末完全溶解
3）盖上玻璃瓶盖，室温(20-25°C)避光孵育3小时,或过夜
4）孵育3小时后，按每10ul抗体的量加入1ul LL-淬灭试剂，静置30分钟后即可使用
*不同的标记物，操作步骤略有不同。（操作步骤供参考，以英文原版说明书为准）

标记结合物的保存
对于任何新结合物，推荐保持于4°C条件下。如需长期保存，可添加保护剂

缓冲液及添加剂兼容性：
A. 与无胺基缓冲液兼容，包括MES,MOPS,HEPES（浓度10-50mM, pH范围6.5-8.5）,LL-Modifier修饰剂提供结合反应的最佳条件
B. 常见的盐（如氯化钠）、螯合剂（EDTA）、糖对偶联反应无影响
C. 叠氮钠（0.02%-0.1%）对结合反应有轻微影响，叠氮钠不可用于HRP标记，其为后者的抑制剂
D. 甘油(up to 50%)对结合效率无影响
E. 若无胺基的缓冲液浓度相对较高，pH值在6.6-8.5范围外，则需要加入更多的LL-midifier修饰剂（/10ul抗体），以此来调整pH值。最佳的pH范围为7.3-7.6左右
F. 避免使用含亲核剂的缓冲液，避免还原剂如DTT和2-巯基乙醇，乙醇胺等
G. 浓度达到或稍低于20mM的Tris对结合效率有轻微的影响

Lightening-Link™ 抗体/蛋白标记试剂盒

● 酶标记试剂盒

Lightning-Link® Alkaline Phosphatase (AP)

Lightning-Link® Glucose Oxidase

Lightning-Link® HorserADIsh Peroxidase (HRP)

● 生物素及链霉亲和素标记试剂盒

Lightning-Link® Avidin

Lightning-Link® Biotin

Lightning-Link® Streptavidin