英文名:Gelfree 8100 Fractionation Station
货号:481001
规格:Unit + Cartridges
品牌: Expedeon
随着生物质谱技术的快速发展,蛋白质和多肽分析的分辨率、灵敏度、准确性、鉴定能力大为提高。尤其是Top-down蛋白质鉴定方法大量使用后,传统的一维、二维电泳或液相色谱等样品制备技术已经不能满足需要。分析前如何降低样品的复杂程度、获得完整蛋白质、富集低丰度蛋白质、降低高丰度蛋白质对低丰度蛋白质的干扰、保留蛋白质的各种翻译后修饰状态、提高样品处理通量等,已成为蛋白质样品制备方法的重要前提。
英国Expedeon公司推出了一套新型的蛋白制备电泳仪 Gelfree 8100 Fractionation System。该系统使用凝胶洗脱液相组分截留电泳技术(gel-eluted liquid fraction entrapment electrophoresis,GELFREE),基于蛋白质分子量的不同,对完整蛋白质进行分组,使用移液器在液相中回收蛋白质。该系统能在短时间内同时处理8个样品。在3.5kDa 500kDa范围内,相对于其它传统分组方法,具有上样量大、重现性好、分辨率高、回收率高、分离速度快和操作简单的优点。能增大蛋白质组分析的覆盖范围,改善后期质谱分析的结果,提高蛋白质鉴定结果的可信度。
特点及应用
基于分子量的不同对完整蛋白质进行分离纯化,收集;
蛋白质样品在液相中回收,避免了传统一维、二维电泳后的染色和条带或点位切割步骤;
蛋白质分离范围高达3.5kDa 500kDa;
8个分组通道,满足高通量样品处理的要求,每个通道最多可将样品分为30个组分;
用户可根据需要自行设置蛋白质分组程序,分离纯化特定的目标蛋白;
样品容量大,每个通道蛋白质上样量最高可达1mg,是普通一维电泳的5倍以上,有利于富集低丰度蛋白质;
回收率高,
重现性好,CV
分离过程不受蛋白质疏水性或等电点的影响,这就意味着你几乎覆盖整个蛋白质组。
简化蛋白质组成的复杂程度,缩小复杂蛋白质样品的动态范围,便于使用LC-MS/MS进行Bottom-Up蛋白质组学研究;
蛋白质回收后保留其完整性,便于进行Top-Down蛋白质组学研究,分析翻译后修饰、蛋白质异构体、氨基酸衍生物等;
蛋白质回收后在溶液内消化,免去了费时的胶内消化步骤;
特别适合为LC-MS/MS、MALDI-TOF或免疫印迹等分析方法制备样品;
Gelfree 8100蛋白制备电泳仪由主机和8通道电泳槽两部分构成。主机设计紧凑,能为8个独立的电泳通道提供电压,设置暂停用于收集组分。使用触摸屏,可以设置电压、组分系列和使用的通道数等参数,进行宽范围的组分分析或目标蛋白的富集。运行过程中,触摸屏实时显示每个通道电泳状态及电压电流值。

电泳槽由五个部分组成,分别是:阴极缓冲液槽、上样槽、电泳凝胶管、样品收集槽、阳极缓冲液槽。电泳凝胶管是内装预制SDS-PAGE胶的玻璃管。缓冲液槽与上样槽及收集槽之间由一个截留分子量为3.5kDa的膜分隔开。
电泳槽套盒:
一次性电泳槽套盒含8个独立通道,可同时或分别使用1 8个通道,处理1 8个样品,未使用的通道可保存供以后使用。针对不同的需求,提供四种电泳槽套盒供选择。

Gelfree 8100蛋白制备电泳仪的工作原理:


Sample complexity necessitates extensive fractionation for in-depth proteomic analysis using mass spectrometry. Protein Discovery, now part of the Expedeon group, has developed a commercial system using a novel technology, termed Gel Elution Liquid Fraction Entrapment Electrophoresis (GELFREE), for molecular weight-based fractionation of intact proteins with liquid phase recovery. Eight samples are run in parallel using a programmable control module in ca. 90 minutes. The system is shown to provide robust fractionation over the mass range 3.5 kDa - 500 kDa with high loading capacity, reproducibility, and recovery.
The Gelfree 8100 Fractionation System for mass spectrometry sample preparation partitions complex protein mixtures into userselectable liquid-phase molecular weight fractions.
Intact protein molecular weight fractionation, isolation, and purification
Liquid-phase recovery without band or spot cutting
Broad mass range fractionation up to 500 kDa
Up to eight samples processed in parallel
Programmable fractionation for isolating and purifying targeted proteins
High protein recovery ( 80%)
High reproducibility ( 15% CV)
Sampling unbiased by hydrophobicity, pI
High loading capacity ( 5X more than a 1D gel)
Proteins are recovered intact, for complete characterization
ApplicationsSimplify and reduce the dynamic range of complex protein mixtures for bottom-up discovery proteomics using LC-MS/MS
Fractionate and recover proteins intact for top-down proteomics
Isolate and enrich user-selected molecular weight fractions for targeted protein quantification using LC-MS/MS
Isolate intact proteins to analyze variants, post-translational modifications, alterations
Separate protein pull-down components for target protein purification
Separation, isolation, and intact recovery of antibodies intact for in-depth characterization
ComponentsThe Gelfree 8100 Fractionation System consists of the Gelfree 8100 Fractionation Station and ready-to-use Gelfree 8100 Cartridges.