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12月10日，著名在线实验室指南出版公司Springer Protocols在线发表了关于外泌体和微泡的研究方法手册。Exosomes and Microvesicles: Methods and Protocols这本实验方法手册汇集了用于各类研究细胞外囊泡（extracellular vesicles, EV）的方法。在过去十年中，在我们更多地了解外泌体、微泡和其他EV在细胞生物学的许多方面的作用时，EV研究领域已经有显著的增长。已经发现了EVs在细胞与细胞通讯中的新兴作用，及其作为疾病生物标志物来源和用作治疗的递送剂的潜力。本卷“Methods in Molecular Biology”中的方案涵盖了用于分离分析各种来源EV的方法。其中使用电子显微镜、可调电阻脉冲感测和纳米粒子跟踪分析。此外，使用多种不同方法的蛋白质组学和基因组分析方法的具体章节中包含EV蛋白质和核酸成分的分析。也包含用于从不同来源（例如血小板、神经元细胞和组织）分离EV的方法。综合这些，该手册提供了用于研究EV的相关方法的全面讨论。主要包含以下内容：细胞外膜泡的研究方法总论。Methods to Analyze可调电阻脉冲检测表征细胞外膜泡。Tunable Resistive Pulse Sensing for the Characterization of Extracellular Vesicles纳米粒子跟踪分析外泌体的免疫特征。Immuno-Characterization of Exosomes Using Nanoparticle Tracking Analysis细胞外膜泡的电镜观察和量化。Imaging and Quantification of Extracellular Vesicles by Transmission Electron Microscopy通过qPCR和数字PCR定量分析外泌体的miRNA。 Quantitative Analysis of Exosomal miRNA via qPCR and Digital PCR外泌体中小RNA的文库构建。Small RNA Library Construction for Exosomal RNA from Biological Samples for the Ion Torrent PGM™ and Ion S5TM System.通过差速离心分离方法对不同类型细胞外膜泡的分离和蛋白鉴定。A Protocol for Isolation and Proteomic Characterization of Distinct Extracellular Vesicle Subtypes by Sequential Centrifugal Ultrafiltration利用蛋白芯片分析小细胞外膜泡的特征。Multiplexed Phenotyping of Small Extracellular Vesicles Using Protein Microarray (EV Array)突触激活后的成熟皮层神经元释放的外泌体的纯化和分析。Purification and Analysis of Exosomes Released by Mature Cortical Neurons Following Synaptic Activation大脑细胞外空隙中来源的细胞外膜泡的分离方法。A Method for Isolation of Extracellular Vesicles and Characterization of Exosomes from Brain Extracellular Space通过分离培养细胞的外泌体和微泡研究脘病毒的传染。Isolation of Exosomes and Microvesicles from Cell Culture Systems to Study Prion Transmission血小板来源的细胞外膜泡的分离。Isolation of Platelet-Derived Extracellular Vesicles细胞外膜泡研究的生物信息学工具。Bioinformatics Tools for Extracellular Vesicles Research利用细胞外膜泡转染siRNA 。Preparation and Isolation of siRNA-Loaded Extracellular Vesicles在生理学水流条件下细胞外膜泡与内皮细胞的相互作用。Interaction of Extracellular Vesicles with Endothelial Cells Under Physiological Flow Conditions细胞外膜泡的流式分析。Flow Cytometric Analysis of Extracellular Vesicles恭喜你成为个图VIP！在打印前，点击“下一步”观看2个提示下一步全部 全站无广告全屏阅读全站电子书免费读VIP专属标识微信支付查找“商户单号”方法：1.打开微信app，点击消息列表中和“微信支付”的对话2.找到扫码支付给360doc个人图书馆的账单，点击“查看账单详情”3.在“账单详情”页，找到“商户单号”4.将“商户单号”填入下方输入框，点击“恢复VIP特权”，等待系统校验完成即可。支付宝查找“商户订单号”方法：1.打开支付宝app，点击“我的”-“账单”2.找到扫码支付给个人图书馆的账单，点击进入“账单详情”页3.在“账单详情”页，找到“商家订单号”4.将“商家订单号”填入下方输入框，点击“恢复VIP特权”，等待系统校验完成即可。请通过以下步骤，尝试恢复VIP特权第1步在下方输入你支付的微信“商户单号”或支付宝“商家订单号”第2步点击“恢复VIP特权”，等待系统校验完成即可如何查找商户单号？订单号过期！该订单于2020/09/09 23:59:59支付，VIP有效期：2020/09/09 23:59:59至2020/09/11 23:59:59！如需使用VIP功能，建议重新开通VIP返回上一页

免疫力是人体第一道也是最重要的一道抵抗外界伤害的防护墙。据统计，90%以上的疾病都与免疫力有关。所以当人体尚处于健康状态时，及时把健康有活力的免疫细胞存起来，是将来保障健康的有效手段之一。

要实现长期高活性的冻存，需要经过严格规范的科学操作。整个操作流程简单来说包括如下步骤：签约健康及免疫评估免疫细胞采集专业恒温运输细胞制备质量检验细胞冻存细胞复苏（需要使用时），其中一些重要的步骤小编给您仔细介绍一下：

健康及免疫评估

通过原能特色的健康免疫评估，可以精准的测定您的机体状态，是您对自己的身体有一个全面的了解，这样既可以保证您身体的健康，又可以保证细胞存储库的安全。特别是还可以测定免疫细胞的数量和活力，从而保证采集到的免疫细胞是您当下最为优质的细胞。

免疫细胞采集及专业恒温运输

采用进口的自动化细胞单采设备，通过机器自动分离和收集免疫细胞。然后经原能专利的恒温运输设备，将细胞安全运送到原能细胞制备中心。

细胞制备及质量检验

单采获得的免疫细胞通过专业运输送抵实验室以后，会在实验室中使用原能特殊配制的适合免疫细胞冻存使用的细胞冻存液进行细胞的分装制备，将采集的细胞分装到冻存管中，分为25份或者50份。与此同时，会有一部分采集的细胞样本被送去进行严格的质量检验，检测免疫细胞细胞种类、比例、数量，无菌状态等，检测合格才能予以放行进行冷冻保存。

程序降温及长期冻存

细胞冷冻降温的过程并不是越快越好，而是要遵循慢冻快融的原则，也就是降低过程要相对的慢。原能采用高端的全自动程序降温仪，拥有精密的降温速度，准确地控制冷冻过程，偏差不超过0.1℃。在半个小时之内将细胞降温至零下80度。之后，细胞被转移至-196℃液氮储存罐中长期保存，此时细胞反应速率仅为摄氏37度体温的91027分之一，生命活动暂停，犹如沉睡中的睡美人，静待唤醒。

2020年11月6日12月10日,著名在线实验室指南出版公司Springer Protocols在线发表了关于外泌体和微泡的研究方法手册。 Exosomes and Microvesicles: Methods and Protocols这本实验方法手册汇集了用...