本文为大家介绍氧化应激的产品。 活性氧(ROS)的产生在好氧生物和健康细胞中是不可避免的。在氧化应激下,ROS急剧上升,使膜脂、蛋白和核酸发生变化。这些生物分子的氧化损伤与衰老以及各种疾病相关,包括动脉粥样硬化、癌症、神经退行性失调等。 LifeTechnologies提供多种荧光试剂追踪氧化应激各种指标,包括:
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CellROX®氧化应激试剂——包括CellROX®Green、CellROX®Orange、CellROX®DeepRed和各种套装——是能够可靠地检测活细胞中的ROS的荧光探针。细胞渗透性CellROX®试剂一旦氧化,即可发出明亮荧光。CellROX®Green试剂与DNA结合(荧光信号主要位于细胞核和线粒体内),而CellROX®Orange和DeepRed试剂则位于胞质。 采用传统的荧光显微镜、高内涵成像和分析、微孔板荧光光度计或流式细胞仪测量产生的荧光。染色操作过程极为简单,可将试剂直接加入完全培养基或缓冲液中的细胞。与传统的ROS检测染料相比,所有CellROX®试剂的光稳定性极强。此外,经甲醛固定后,CellROX®Green和CellROX®DeepRed试剂仍可保留在细胞内,与用于ROS检测的经典染料相比,分析灵活性更高,操作步骤进一步改善。CellROX®Green染色在去污剂透化作用下亦可保持稳定。
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图1人骨肉瘤(U2OS)细胞检测氧化应激。表达CellLight®Actin-RFP的人U2OS细胞以100μM甲萘醌处理1h。加入5μMCellROX®Green(C10444)和2滴/mlNucBlue™LiveCellStain(R37605)于37℃孵育30min。细胞洗涤后,加入LiveCellImagingSolution(A14291DJ)重悬成像。 产品列表 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
FCM:FCM:flowcytometryHCS:HighContentScreeningIF:ImmunofluorescenceM:microplateassay | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
脂质过氧化反应是将脂类进行氧化降解。ROS是脂质过氧化反应的主要启动者,膜结合的多元不饱和脂肪酸如花生四烯酸和亚油酸是它们的主要靶标。脂质过氧化反应的副产物会直接损伤细胞膜。它们也会形成蛋白加合物,引起细胞和组织损伤。脂质过氧化反应与很多人类疾病有关,如糖尿病、心血管疾病。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
图2使用Click-iT®LipidPeroxidationImagingKit测定氯化血红素在BPAE细胞中诱导的脂质过氧化反应。牛肺动脉内皮细胞(BPAE)细胞接种于35mm玻璃皿中,加入50μMClick-it®LAA于37℃孵育30min。细胞加/不加10μM氯化血红素处理2h后,以4%甲醛固定15min、0.05%TritonX-100通透15min,封闭后加入5μMAlexaFluor®488azide孵育30min,细胞核以Hoechst33342染色。 产品列表
FCM:FCM:flowcytometryHCS:HighContentScreeningIF:ImmunofluorescenceM:microplateassay | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ROS如超氧化物、过氧化自由基、过氧化氢、羟自由基和过氧亚硝酸盐等可以与核酸、蛋白和脂类作用,导致细胞和组织损伤。某些ROS与人类疾病有关,如癌症、心血管疾病、神经退行性疾病和衰老。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
图3使用MitoSOX™Redsuperoxideindicator检测活细胞中的超氧化物。3T3活细胞经超氧化物清除剂FeTCPP处理(右)或不处理(左),随后标记MitoSOX™Red试剂,在被超氧化物氧化后可发出荧光。细胞核经Hoechst33342染色。未处理细胞的线粒体展现红色荧光,表明超氧化物存在,而处理过的细胞则只有微弱的荧光。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
产品列表
FCM:FCM:flowcytometryHCS:HighContentScreeningIF:ImmunofluorescenceM:microplateassay | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
还原性谷胱甘肽也称为GSH,是与蛋白结合的主要的巯基化合物,此类物质对测定细胞氧化还原状态具有重要作用。因此GSH水平可用于指示氧化还原电位和细胞阻止氧化应激的能力。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
货号 | 产品名称 | 应用 | Ex/Em | 规格 |
T10095 | ThiolTracker™Violet | FCM;IF;HCS | 404/525 | 180assays |
T10096 | ThiolTracker™Violet | M | 404/525 | 500assays |
M1381MP | Monochlorobimane(mBCI) | FCM;IF;HCS;M | 394/490 | 25mg |
M1378 | Monobromobimane(mBBr) | FCM;M | 394/490 | 25mg |
阅读原文:http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2014040018.html