Biolife AseX一步法无缝克隆同源重组酶试剂盒

一材料与设备1)T4DNA 连接酶2)T4 多聚核酸激酶3)RNA 供体4) 受体5) 寡核苷酸 cDNA 模板6)10X 连接缓冲液：500 mmol/LTris-HCl(pH7.5)，100 mmol/LMgCl2，200 mmol/LDTT,0.5 mg/mLBSA(适用 NewEngtandBiolabs 连接酶）或 660 mmol/LTris-HCl(pH7.6)，66 mmol/LMgCl2,lOOmmol/LDTT(适用于 Amersham/USB 连接酶）                                    7)[Y32P]ATP(10mCi/ml,300Ci/mmol=3.33umol/L)8) 无 RNase 水9)l0 mmol/LATP10)RNasin。11) 无 RNase 的 DNase。12) 真空离心浓缩仪。13）5XTBE:54 gTris，27.5 g 硼酸，20 ml0.5mol/LEDTA(pH8.0)14)2X 变性胶上样缓冲液：10mol/L 尿素，1XTBE 或 80% 甲醛，1XTBE15)TE；10 mmol/LTris-HCl(pH8.0),lmmol/LEDTA二、操作方法1. 磷酸化 3＇RNA1) 在 1.5 ml 管中加入 5ul[γ32P]ATP(50ulCi,16pmol)，用真空离心浓缩仪干燥。2) 在此管中加入：0.5ul10X 连接缓冲液，3ul20umol/L3＇RNA,1ul 水，0.5ulT4 多核苷酸激酶, 终体积为 5.0ul3) 于 37℃: 孵育 30〜60 min4) 于 75°C 孵育 l0min 或 92〜95℃ 孵育 2 min, 灭活多核苷酸激酶。置于冰上2. 连接反应1) 在灭活的多核苷酸激酶反应管中，加 1.0ul10×连接缓冲液.3.0ul20umol/L5＇RNA,3ul20umol/LcDXA 模板。2) 加热至 75℃ 2 min 再室温放置 5 min, 杂交 RNA 与 DNA。3) 在杂交反应液中加入 1.l0 mmol/L 冷 ATP，2ul T4DNA 连接酶，至终体积 15ul4) 于 30°C 孵育 2〜4 h。5) 加 lul 无 RNase 的 DNase, 于 37℃ 孵育 15〜30 min6) 加 16ul 2X 上样缓冲液，上样电泳，可以检测到标记的 5＇RNA 与 3＇RNA 以及相成于连接产物的全长分子。 对于有效的连接，桥梁 cDNA 模板的浓度非常重要，最好等于或介于两种待连接的 RNA 分子的浓度之间，如模板过量，RNA 分子就会与不同的 cDNA 模板结合，而无法同另意 RNA 分子结合。我们建议连接反应中 RNA 的浓度最好为 0.1〜10umol/L 您知悉并同意，丁香通平台展示产品并非为平台自身产品，您发起询价或试用申请后，平台将会把您已提供或按要求提供的相关信息同步提供至所咨询的具体产品商家，由商家为您提供具体产品的价格咨询或产品试用注意事项及相关试用产品或完成相应购买，因此您知悉并授权平台将您的信息进行同步共享。您有权拒绝，但您知悉将无法参加询价或试用活动。

bayoubiolabsRepair-It产品说明Repair-It™DNA修复的突破产品简介：Repair-It™是高纯度酶的专有技术混合物，具有广泛的DNA修复功能。Repair-It™能够进行以下DNA修复：（a）修复双链DNA中的几乎所有单链切口。（b）几乎修复双链DNA中的所有单链缺口。（c）修复脱嘌呤/脱嘧啶位点。（d）将双链DNA的末端转化为平端。应用：Repair-It™可用于任何需要修复DNA以产生双链DNA而无任何单链缺口，缺口或脱嘌呤位点的应用。因此，它可用于克隆应用，DNA修复研究或修复随时间降解的DNA。Repair-It TM可用于将开环质粒转化为松弛的共价闭合环状形式。Repair-It™可用于产生平端DNA。Repair-It™不会切割DNA，也不会使DNA末端磷酸化或去磷酸化。该试剂盒含有足够的试剂，可以修复150毫克的DNA。将典型的反应在37℃温育1小时以实现完全的DNA修复。我们建议您在购买前阅读产品信息表（链接如下）。提供：Repair-It™提供足够的40X缓冲液和40X核苷酸溶液。低价格：只需150美元即可修复150毫克DNA。运费：湿冰。价钱目录描述$ 150R-101Repair-It™，修复150毫克DNA$ 400R-102Repair-It™，修复750毫克DNARepair-It™是Edward David Hyman的商标 关注本网官方微信 随时阅读专业资讯

Irvine Scientific代理商/羊水培养基代购 详细摘要： Irvine Scientific代理商/羊水培养基代购，CHANG Medium Basal was developed for the primary cu... 产品型号：C100 所在地：苏州市 更新时间：2020-03-12 参考价： 面议 在线留言

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  供应商：	广州博徕斯生物科技股份有限公司
  数量：	99
  保质期：	12months
  保存条件：	-20℃
  规格：	30 rxn

  Bio-LifeAseX一步法克隆试剂盒，采用新一代高度优化的增强型重组酶Bio-LifeAseX，可将目的基因简单、快速并且高效地定向克隆至任意载体的任意位点。
  
  产品特点
  简单、快速、高效，适用于任何载体
  不依赖于连接酶，无载体自连现象，阳性率可达98%以上
  可高效克隆50bp-10kbpDNA片段
  无需考虑插入片段自身携带的酶切位点
  可同时克隆两个或多个DNA片段
  
  产品应用
  快速克隆
  高通量克隆
  无缝克隆
  DNA定点突变
  
  

  温馨提示：不可用于临床治疗。

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