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AP-TAG技术彻底改变了检测和克隆细胞表面受体和配体的方式。本发明的实质是允许将编码任何分泌的多肽配体或受体胞外域的cDNA序列与pAPtag克隆载体中的人胎盘分泌的碱性磷酸酶(AP)框内融合。当在293T或CHO细胞中表达时,所得的配体-AP融合蛋白(称为AP-body)可以高水平分泌到培养基中,因此可以通过AP活性测定或使用抗AP抗体的Western印迹分析轻松检测到。因此,配体-AP或可溶性受体-AP融合蛋白可以像抗体一样用作亲和剂,从而可以最方便,安全和灵敏地检测和克隆其相应的细胞表面受体或配体。

自发明以来,已经通过AP-TAG技术克隆了许多重要的细胞表面受体和配体,包括瘦蛋白,信号蛋白III,Nogo-66,IL-24,果冻肚的受体,以及Kit,Mek4和Sek受体酪氨酸激酶的配体。


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