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Green Mountain Antibodies在内部开发了一种针对牛血清白蛋白的小鼠单克隆抗体。BSA抗体GMA-630在固相ELISA中结合BSA和BSA偶联肽。单克隆不能用于免疫印迹。牛血清白蛋白抗体是IgG2b同种型,通过SDS-PAGE测试纯度> 98和。
BSA(牛血清白蛋白),也称为馏分V,是一种源自牛的可溶性66.5 kDa蛋白。白蛋白约占血清血液蛋白质的一半,在实验室环境中通常用作蛋白质浓度标准品,酶的稳定剂或封闭剂。BSA通常用作小分子(如肽)的结合物,以增加其大小并赋予更适合于诸如固相ELISA等测定的特性。
在使用BSA偶联物的实验中,严格的实验应包括阴性对照,这些阴性对照应证明对目标肽的应答,而不是分子的BSA部分-抗BSA抗体可用作该对照集的一部分。
在最近的Octet实验中,确定定制抗体与其抗原之间的亲和力,信号太低而无法准确解释,这可能是由于肽呈递周围的空间问题。为了克服这个问题,开发了一种方法,其中使用GMA-630捕获结合了牛血清白蛋白的肽,从而以一种可以更好地与抗体结合的方向呈现该肽,从而将信号增加到可测量的水平。
Green Mountain Antibody的IX因子(FIX)抗体,由于其开创性的患者Stephen Christmas而被称为Christmas Factor,是血浆中的单链蛋白(Mr 55,000),包含维生素K依赖性氨基酸γ-羧基谷氨酸。通过因子XIa激活因子IX抗体可去除35个氨基酸的激活肽,从而形成由轻链二硫键与重链结合的双链结构。在钙的存在下,丝氨酸蛋白酶激活的因子IX(FIXa)与因子VIIIa在磷脂表面上形成复合物,形成肌腱复合物,将因子X转化为其活化形式。IX因子抗体也被抗凝血酶抑制。FIX在导致血栓形成的凝血级联中起重要作用。在人类和小鼠中,它的存在随着年龄的增长而增加。FIX抗体缺失或缺陷是X连锁隐性出血性血友病B的病因。重组因子IX是目前的一种治疗方法,但因子IX也是基因疗法研究的积极目标,并且目前有多家制药公司参与广泛的研究已经确定,FIX功能可能受单个氨基酸(例如R338L帕多瓦(Padua)变体和天然存在的Thr 148变体)变化的影响。Green Mountain Antibodies已在内部开发了9种针对IX因子的小鼠单克隆抗体。下表列出了这些抗体及其通过ELISA的物种特异性和应用。已通过蛋白质印迹,APTT分析,ELISA和BLI中的抑制作用对抗体进行了测试。GMA-101已用于免疫组织化学。已鉴定出许多对,例如GMA-102和生物素化的GMA-184,它们可用于三明治ELISA形式以检测血浆中低水平的人类FIX。