我们提供一系列基于凝胶的测定法,并具有多年与制药公司和学术界的客户合作的经验。
DNA旋转酶超螺旋
DNA拓扑异构酶I松弛
DNA拓扑异构酶II松弛
DNA拓扑异构酶II变性
DNA拓扑异构酶IV松弛
DNA拓扑异构酶IV脱落
这些都使用琼脂糖凝胶将反应产物与底物分离。在管中进行超螺旋和松弛反应,然后使用琼脂糖凝胶分离产物。分离使得可以看到不同的拓扑异构酶中间体以及超螺旋和松弛质粒。
蜕皮反应可测量从kris中的小环和大环复合物中DNA小环的解链,该复合体已从Crithidia fascicula中分离出来 。与松弛反应相比,某些酶在脱脂中具有更高的活性。
与基于微量滴定板的测定相比,基于凝胶的测定的结果的视觉性质可提供有关反应的更多信息。它们可用于筛选化合物的活性以及确定IC 50值。
DNA的裂解是拓扑异构酶反应机制的重要组成部分,裂解复合物的稳定化是许多抑制剂(例如喹诺酮和依托泊苷)活性的关键。切割测定可用于确定化合物在稳定切割复合物中的活性。
DNA展开分析可用于确定化合物是否为嵌入剂。