蛋白的浓缩方法

蛋白质的浓缩方法

目前蛋白浓缩方法基本主要有以下几种：

1.

透析袋浓缩法

利用透析袋浓缩蛋白质溶液是应用最广的一种。

将要浓缩的蛋白溶液放入透析袋

（无透析袋

可用玻璃纸代替）

，结扎，把高分子

（

6000

－

12000

）聚合物如聚乙二醇（碳蜡）

、聚乙烯

吡咯、烷酮等或蔗糖撒在透析袋外即可。也可将吸水剂配成

30

％－

40

％浓度的溶液，将装

有蛋白液的透析袋放入即

可。

吸水剂用过后，

可放入温箱中烘干或自然干燥后，

仍可再用。

主要用于更换蛋白质的缓冲液，有透析袋即可，不需要特殊的仪器。

2.

冷冻干燥浓缩法

这是浓缩蛋白质的一种较好的办法，它既使蛋白质不易变性，又保持蛋白质中固有的成分。

它是在冰冻状态下直接升华去除水分。具体做法是将蛋白液在低温下

冰冻，然后移置干燥

器内（干燥器内装有干燥剂，如

NaOH

、

CaCl2

和硅胶等）

。密闭，迅速抽空，并维持在抽

空状态。数小时后即可获得含有蛋白的干燥粉

末。干燥后的蛋白质保存方便，应用时可配

成任意浓度使用。也可采用冻干机进行冷冻干燥。

在冷冻状态下让扬品种的液体升华

3.

吹干浓缩法

将蛋白溶液装入透析袋内，放在电风扇下吹。此法简单，但速度慢，且温度不能过高，最好

不要超过

15

℃。

4.

超滤膜浓缩法

此法是利用微孔纤维素膜通过高压将水分滤出，

而蛋白质存留于膜上达到浓缩目的。

有两种

方法进行浓缩：

一种是用醋酸纤维素膜装入高压过滤器内，

在不断搅拌之下过滤；

另一种是

将蛋白液装入透析袋内置于真空干燥器的通风口上，负压抽气，而使袋内液体渗出。

主要针对小体积蛋白质溶液（几

ml

）此法更不易引起变性，不过得有浓缩器，不是哪个实

验室都有的。

5.

凝胶浓缩法

选用孔径较小的凝胶，如

SephadexG25

或

G50

，将凝胶直接加入蛋白溶液中。根据干胶的

吸水量和蛋白液需浓缩的倍数而称取所需的干胶量。

放入冰箱内，

凝胶粒子吸水后，

通过离

心除去。

6.

浓缩胶浓缩法