苏州蚂蚁淘生物科技有限公司是一家经营医药标准品、化工环境标准品、高端试剂的专业公司,是全球领先科研方案的专业供应商。
自成立以来,公司坚持以“保障客户利益是我们的第一追求”为经营宗旨,发展成为全球多个高端标准品公司国内总代理和授权代理商,能提供超过100000种的有机和无机标准品或试剂,产品涉及药企,科研单位,检测机构,工厂实验室和高校等绝大部分科研单位;同时提供优质的咨询服务,实力雄厚。
公司以代理经营为主,代理20多个国外知名品牌的标准品、对照品,高端化学试剂,包括欧标EP,欧盟IRMM,日标JP,印度标IP,加拿大TRC,TLC,MC,英国BP,LGC,NIBSC,美国NIST,ChromaDex,美国Zyagen,挪威Chiron等。
当时第一次看到这个技术的时候,简直可以用“震惊”、“惊艳”来形容。扩增速度真快啊,十几分钟就能出结果,比现在吭哧吭哧做PCR岂不是方便多了!可是几年过去了,似乎也没看到基于RPA技术的临床产品上市。说真的是有点失望的。就像对一部大导演拍的电影满怀期待,看完了发现其实不咋地是一样的心情。
一、TwistDx公司的RPA技术重组酶聚合酶扩增(RecombinasePolymeraseAmplification,RPA)具体原理不再介绍。2006年发明,到目前为止开发了一系列产品,都用在科研上。发表的论文也有一些,病原体检测、动植物检测都有。网上搜索了一番,发现整个2019年都没什么新闻,TwistDx官网的News板块还停留在2018年四月。公司被雅培收购以后,没什么动静。按理说这么优秀的技术,这么多年过去了,不应该没出临床产品。什么原因?成本高?(真正好的技术成本高点也无妨)专利?(不愿意授权给别的厂家共同开发产品?)技术本身准确性不如新闻说得那么好?雅培根本不重视这个方向?不得而知。
二、等温扩增的技术难点笔者曾经接触过LAMP等温扩增一段时间。LAMP引物难设计,非特异扩增(假阳性)难消除;对实验条件要求不高,恰恰造成了容易污染实验环境;扩增时间跟样本浓度有关,低浓度样本扩增时间很长,跟荧光PCR相比时间上差不多。最终因为非特异扩增问题项目不了了之。
三、国产等温扩增产品目前国内等温扩增科研产品不少,获得注册证的产品并不多。1.等温扩增微流控芯片北京某公司产品,LAMP方法,一次检测多种病原体。曾遇到某医生对这个仪器赞不绝口,使用方便,灵敏度较高。2.RNA恒温扩增上海某公司产品。据医生介绍(两年前),灵敏度不如荧光PCR法,结果不是很稳定。相信这两年产品性能已经有了改进。3.恒温扩增-层析法武汉某公司产品。做成了POCT产品,操作简便。如果能家用就更好了,感冒了在家里测一下,也省得去医院。但不知是如何规避污染问题的,卡盒如果没有密封措施,容易造成气溶胶污染。
四、小结现在临床上荧光PCR使用广泛,既有大型的自动化工作站,也有小型的POCT产品。单纯靠等温扩增作为亮点并没有那么容易进入医院。不管是等温扩增还是荧光PCR,一个好产品最重要的还是结果准确、操作简便。有的技术号称扩增只需十几分钟,结果需要手工提取核酸花上一个小时,一样不实用。除了医疗用途,食品、畜牧等行业咱不懂,就不做评论。
TwistDx公司开发的重组酶聚合酶扩增(RPA),被称为是可以替代PCR的核酸检测技术。以此为基础的TwistAmp核酸扩增产品,能够在15分钟内进行常温下的单分子核酸检测。该技术对硬件设备的要求很低,特别适合用于体外诊断、兽医、工业应用,食品检测,农业,公共卫生,生物安全和环境感知等相关领域。
RPA反应的最适温度在37℃~42℃之间,无需变性,常温下即可反应,大大加快了PCR的速度。并且由于不需要温控设备,RPA可以真正实现便携式的快速核酸检测。RPA检测的灵敏度很高,能够将痕量的核酸(尤其是DNA)模板扩增到可检出水平,从单个模板分子得到大约1012扩增产物。无需复杂样品处理,即可实地检测;既可扩增DNA也可扩增RNA,省去额外的CDNA合成步骤;检测方式多样:终点检测、对扩增过程进行实时监控或通过侧流层析试纸条(LFD)读取结果。


TwistAmpBasicKit(冻干态) | TwistAmpBasicKit(液态)NEW!!! |
● 96freeze-driedRPApellets ● 4x1mlTwistAmp®Rehydrationbuffer ● 1x250µl magnesiumacetate(280mM) ● 6µl ofControltemplate ● 45µl ofControlprimermix | ● 50µl20xCoreReactionMix ● 3ml2xReactionBuffer ● 500µl280mMMgOAc ● 550µl10xE-mix ● 100µlofPositivecontroltemplate ● 45µlofPositivecontrololigomix |
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