CST 抗体选择指南

二、CST一抗（primaryantibody）的选择
正确选择CST一抗一般需要如下几个方面的信息：

1）蛋白的名称及亚型：某些蛋白具有多种不同的亚型，如IKK、PKC、p38等，这需要在选择抗体之前确定要研究的蛋白亚型。还有些抗体由于其抗原选择的是不同蛋白亚型共有的肽段区域，是可以同时识别多个亚型的，我们一般都会在抗体的名称中加入（pan）字样来标明，如Akt(pan)(C67E7)RabbitmAb#4691，就可以识别Akt1、2、3等多个亚型，结果反映的也是所有Akt亚型的总水平。
 

2）磷酸化修饰位点：由于CST抗体有很多是针对蛋白的磷酸化修饰位点，因此CST抗体的命名往往会在蛋白名称后加上括号来标注，如Phospho-4E-BP1(Ser65)Antibody#9451，Ser65即此抗体识别的修饰位点，在选择合适的CST抗体用于特定修饰位点研究时，需要特别注意。有关不同修饰位点的功能，可以通过查阅文献确定，或登陆http://www.phosphosite.org（目前最全的蛋白修饰位点数据库）查询，也可以通过点击CST网站该产品页面中的Background（背景知识）来获取。另外，由于有的蛋白存在不同亚型且序列高度同源，而不同亚型的某些磷酸化修饰位点周围的序列完全相同，因此CST的某些抗体往往会同时识别不同亚型的相似修饰位点，如Phospho-IKKα/β(Ser176/180)(16A6)RabbitmAb#2697既可识别Ser176位点磷酸化的IKKα，也可以识别Ser180位点磷酸化的IKKβ，结果反映的也是两者共有的水平。
 

3）抗体已验证的应用（如WB，IHC，IP等）：CST抗体一般会在出厂前对常见的抗体应用（WB，IHC，IP, ChIP，IF，Flow）进行内部验证，以确定可以满足的不同应用要求。通过验证，达到质检要求的抗体会明确标记，以备参考。一些没有标明的应用，往往是因为经过验证没有达到质检标准而不推荐。比如Acetyl-HistoneH3(Lys18)(D8Z5H)RabbitmAb#13998可以满足除IF以外的所有其他5种应用，有的客户会认为，既然该抗体可以用于IHC，根据经验推断应该可以用于IF，那么很有可能会浪费很多时间和试剂而不能获得结果。也有一些没有标明的应用，可能是因为我们没有用于检测的样本而没有检测CST不推荐您使用没有标明的应用。可以挑选其他的货号，我们可能有适用于这个应用的更好的其它产品。