pnabio具有NLS的Cas9蛋白

pnabio具有NLS的Cas9蛋白

Cas9 Protein with NLS

与引导RNA结合的Cas9蛋白比质粒或mRNA转染为CRISPR / Cas9技术提供了优势。最大的好处是您可以使RNP复合物易于在体内工作。Cas9蛋白寿命短（细胞中半衰期约为24小时），因此将脱靶效应和镶嵌性降至最低。您还可以通过简单的裂解分析轻松地体外测试指导RNA的活性。此外，Cas9蛋白非常稳定，与mRNA相比，活性确认要容易得多。最后，由于它不需要转录或翻译，因此它在线虫，昆虫，植物和非典型模型系统等更广泛的生物中具有活性。

PNA Bio提供的Cas9蛋白与NLS偶联，可以注射/转染。

Cy3-Cas9可以很容易地富集被CRISPR / Cas9复合物转染的细胞。

体外裂解测定

将PCR产物与各种量的Cas9蛋白一起孵育并在凝胶上电泳。体外裂解测定是检查sgRNA活性的简单方法。

RNP复合体的转染

sgRNA的RNP复合体和各种Cas9蛋白通过电穿孔（Neon）或脂转染胺（LF2000）转染到NIH3T3细胞中。

注射RNP复合物

对于小鼠胚胎注射，将60ng / ul的Cas9蛋白和15ng / ul的两个sgRNA各自的RNP复合物注射到小鼠胚胎中。从幼犬中提取尾巴DNA并进行T7E1检测。灰色代表野生型，绿色代表大缺失（＃2,3,4,8），红色代表小in / del（＃5,6,7），蓝色代表纯合子。小in / del（＃9，10）。

Cas9蛋白

化脓性链球菌NLS的Cas9蛋白注射，转染就绪通过体外裂解测定，电穿孔（作为RNP复合物）和
每批小鼠胚胎注射验证的活性标准浓度（CP01，重构为1 mg / ml）：20 ug，50 ug或200 ug（50 ug x 4）高浓度（CP02和CP03，重构为5 mg / ml）：250 ug（CP02）或1 mg（CP03，250 ug x 4）包装：CP01为20 ug或50 ug，CP02 / CP03为250 ug建议使用CP01进行显微注射，建议使用CP02 / CP03进行电穿孔也可用：D10A切口酶（CN01）和D10A / H840A dCas9（CD01）蛋白如果美国东部时间下午5点之前收到订单，Cas9蛋白通常在同一天发货欲了解更多，请联系我们order@pnabio.com或单击此处。

Cas9蛋白的液体形式

可用量为1 mg / ml或5 mg / mlCP04-100：1毫克/毫升（6 uM），20 ug x 5管CP04-500：5毫克/毫升（30 uM），100 ug x 5管

高保真SniperCas9蛋白

具有高保真度且不影响活性的Cas9蛋白变体通过定向进化方法发现可用1 mg / ml（CSP01）或5 mg / ml（CSP02）阅读有关SniperCas9的新出版物切口酶和dCas9蛋白

化脓性链球菌的带有NLS的D10A Cas9切口酶蛋白（CN01和CN02）D10A / H840A Cas9用化脓性链球菌（CD01和CD02）的NLS裂解死亡蛋白有50 ug大小（CN01 / CD01，重构为1 mg / ml）或250 ug大小（CN02 / CD02）。

Cy3-Cas9和Cy3-dCas9蛋白

Cy3用NLS（CP06）标记的Cas9蛋白，可对转染的细胞进行分类和可视化共聚焦显微镜检测荧光通过体外裂解测定和细胞转染证实活性提供25 ug，50 ug，100 ug或200 ug（CP06-200）浓度1 mg / ml或5 mg / ml也提供Cy3标记的dCas9蛋白（CD07）

Cy3-Cas9蛋白的活性通过电穿孔进入细胞，然后进行T7E1分析来确认。通过共聚焦显微镜确认荧光。

产品描述可用尺寸CP01
Cas9蛋白具有NLS的Cas9蛋白（可注射）；
重构为1 mg / ml（6 uM）20 ug（120 pmol / 6 uM x 20 ul）
50 ug（300 pmol / 6 uM x 50 ul）
200 ug（50 ug x 4管）CP02
高浓度
Cas9蛋白具有NLS的Cas9蛋白（可注射）；
重构为5 mg / ml（30 uM）250 ug（1530 pmol / 30 uM x 50 ul）CP03
高浓度
Cas9蛋白具有NLS的Cas9蛋白（可注射）；
重构为5 mg / ml（30 uM）1毫克（250 ug x 4）CP04-100
Cas9蛋白具有NLS的Cas9蛋白（可注射）；
液体形式，1 mg / ml（6 uM）100 ug（20 ug x 5）CP04-500
高浓度
Cas9蛋白具有NLS的Cas9蛋白（可注射）；
液体形式，5 mg / ml（30 uM）500 ug（100 ug x 5）CS01
SniperCas9蛋白HF Cas9 protein with NLS (injection ready);
reconstitutes to 1 mg/ml (6 uM)50 ug (300 pmol / 6 uM x 50 ul)
200 ug (50 ug x 4 tubes)CS02
High conc
SniperCas9 proteinHF Cas9 protein with NLS (injection ready);
reconstitutes to 5 mg/ml (30 uM)250 ug (1530 pmol / 30 uM x 50 ul)CN01
nickase proteinCas9 D10A Nickase protein injection ready with NLS; reconstitutes to 1 mg/ml (6 uM)50 ugCN02
nickase proteinCas9 D10A Nickase protein injection ready with NLS; reconstitutes to 5 mg/ml (30 uM)250 ugCD01
dCas9蛋白具有NLS的Cas9 D10A / H840A蛋白;
准备注射，复溶至1 mg / ml（6 uM）50微克CD02
dCas9蛋白具有NLS的Cas9 D10A / H840A蛋白;
准备注射，复溶至1 mg / ml（6 uM）250 ug（50 ug x 5管）CP06
Cy3-Cas9蛋白Cy3用NLS标记Cas9蛋白；
1 mg / ml或5 mg / ml溶液（30 uM）25 ug / 50 ug / 100 ug / 200 ugCD07
Cy3-dCas9蛋白Cy3用NLS标记Cas9死亡蛋白；
5 mg / ml溶液（30 uM）50微克
200微克