试剂采购 Illumina授权

蚂蚁淘是生物试剂电商平台，主营：海外试剂抗体，进口实验仪器，海外诊断原料等生物医学科研用品进口。我司希望借助互联网平等而开放的力量，矢志实现生命科学领域全球的信息同步与标准化，简化科学家的采购流程，节省科学家宝贵时间。如需商业合作，请联系info@ebiomall.com。

illumina 激光共聚焦微珠芯片平台为全世界的科研用户提供了最为先进的SNP（单核苷酸多态性）研究平台。Illumina的SNP芯片有两类，一类是基于infinium技术的全基因组SNP检测芯片（Infinium™ Whole Genome Genotyping），适用于全基因组SNP分型研究及基因拷贝数变化研究，一张芯片检测几十万标签SNP位点，提供大规模疾病基因扫描(Hap660,1M)。另一类是基于GoldenGate™特定SNP位点检测芯片，根据研究需要挑选SNP位点制作成芯片(48-1536位点),是复杂疾病基因定位的最佳工具。

技术特点：

1． 独特的位点选择和设计，采用全世界公认的HAPMAP数据库中已经公布的TagSNP设计，具有无可比拟的全覆盖优势。

2． 高重复性和特异性

3． 超高通量的密度

4． 超高的成功率和准确性

人类SNP检测芯片

（1）Illumina Human 1M-duo beadchip：1张芯片上包含100万个探针信息，可在一张芯片上平行进行两个样品的检测。

（2）Illumina Humanomni1-quad beadchip：该款芯片是千人基因组计划可采用的第一个商业产品。1张芯片上包含100万个探针信息，可在一张芯片上平行进行四个样品的检测。该款芯片覆盖了已知领域的拷贝数变异（CNV）和已知疾病相关的SNPs，每个样本可以检测一百多万个位点（TagSNP）

（3）Illumina Human 660w-quad beadchip：1张芯片上包含66万个位点信息，可在一张芯片上平行进行四个样品的检测。并可以检测基因拷贝数（CNV）的变化。

（4）肿瘤相关SNP芯片（Cancer SNP Panel）：

l 1421个有效位点，

l 覆盖400个癌症相关基因

l 位点选自national cancer institute’s cancer genome anatomy project SNP500 cancer 

Database。

（5）主要组织相容性研究SNP芯片（Major Histocompatibility Complex（MHC）Panel Set

l MHC 区域2360个SNP 位点，平均距离2kb。

（6）HumanCytoSNP-12 v1.0 DNA Analysis BeadChip Kit  (12) 人CytoSNP 研究芯片     该款芯片的每张chip上可以同时检测12个样本，每个样本可以检测30万个位点（TagSNP）

其他SNP检测芯片

牛全基因组SNP芯片（Illumina BovineSNP50 Genotyping Beadchip）

犬全基因组SNP芯片（Illumina CanineSNP20 Genotyping Beadchip）

马全基因组SNP芯片（Illumina EquineSNP50 Genotyping Beadchip）

猪全基因组SNP芯片（Illumina PorcineSNP60 Genotyping Beadchip）

羊全基因组SNP芯片（Illumina OvineSNP50 Genotyping Beadchip）

玉米全基因组SNP芯片（Illumina MaizeSNP50 Genotyping Beadchip）

个性化定制芯片（GoldenGate™）

以GoldenGate技术为基础的用户自定义芯片，针对所有物种， 客户提供位点周围的序列信息或Rs号等即可，每个样品可同时进行96,384,768,1536plex　SNP位点的研究。

芯片形式灵活：

Illumina公司的芯片有两种格式，即Sentrix Array Matrix和Sentrix BeadChip

Sentrix Array Matrix为大通量样本设计，每张芯片可进行96个样品的研究

Sentrix BeadChip每张芯片可进行16个样品的研究

基因组服务

Illumina提供了多样化的服务组合，以支持广泛的基因组应用。无论您是进行基于人群的大规模基因分析研究，进行癌症研究还是推进育种计划，Illumina和我们的合作伙伴都能为您提供所需的解决方案。

借助久经考验的IlluminaNGS和阵列技术以及科学专家网络，客户越来越有能力加快发现机会。Illumina服务网络提供了一个从样品到数据的解决方案，可以保证交付高质量的数据，从而帮助您以前所未有的速度和效率找到答案。

Illumina还提供许多其他服务，包括核心实验室计划，服务合作伙伴关系，分析和数据管理解决方案以及财务解决方案。

Illumina测序流程简介




二代测序也称大规模平行测序。




主要平台有3家：Illumina的HiSeq、MiSeq以及早期的GA；Roche的454；LifeTechnologies（即ABI，现ThermoFisher）的SOLiD、IonTorrent和IonProton如今Roche已经停产。




简单归纳，3家的原理如下：

Roche454FLX：Pyrosequencing（焦磷酸测序），检测焦磷酸转换成的荧光信号，emulsionPCR;

Illumina:Sequencing-by-synthesis（边合成边测序）withreversibleterminators,bridgePCR;

ABISOLiD:Sequencingbyligation（边连接边测序）,emulsionPCR;

ThermoIonTorrent:Pyrosequencing（焦磷酸测序）,检测质子电位（pH值），emulsionPCR。







Illumina技术是所有二代测序技术路线中最简便的，直奔目的，不绕弯子。因为简单直接，所以稳定可靠，重复性强，数据质量高，错误率低。




illumina整个测序分4步：

核酸提取，文库制备，簇生成，测序，数据分析。

上机前：核酸提取，文库制备，簇生成。

上机后：测序及数据分析。




A核酸提取

样本类型：培养的细胞、外周血、新鲜冷冻组织或石蜡包埋组织(FFPE)

提取核酸类型：DNA、总RNA或者小RNA




步骤：

样本提取-纯化-定量

标准流程需求：0.1-1ugDNA或RNA

试剂：提取及纯化试剂盒

定量仪器:Nanodrop显示A260/280，可显示纯度

1标准流程2低量流程（依自条件和经验而定）

B文库构建

文库制备的具体流程因样本种类和测序目的的不同而不同，比如基因组DNA，转录组(mRNA)，microRNA,CHiP-Seq，外显子捕获测序等等，但是大同小异，基本过程是把长链DNA随机打断成短片段，两端接上通用引物，再经过12循环左右的PCR把文库放大。

基因组文库构建步骤：

基因组DNA--350bp左右DN**段—barcode接头序列—12循环左右文库扩增片段化、连接、扩增“三板斧”期间穿插进行一些纯化、定量的辅助步骤。

1片段化：

原则是断点越随机越好，片段长度越集中越好

方法：高压气体的雾化作用、超声波的气穴作用、普通超声波、酶等手段、设备。




一般而言：

SR测序的模板长度约350碱基，PE测序的模板长度约500碱基，MP测序的模板长度约1k-10k碱基

超声方法片段化后片段大小呈正态分布，通过琼脂糖电泳割胶或者用不同缓冲液下磁珠纯化方法来进一步收缩片段长度范围，精选所需片段。

2末端修补

一般而言，末端修补要用到3种酶：5’端延伸的酶，5’端连接的酶，以及3’端延伸的酶。

33’端加A

目的：为了提高连接效率，也为了防止接头与插入片段以多种方向连接，同时减少接头之间的互联，接头与插入片段之间的连接采用TA半粘性末端的连接方式。

方法：接头的3’端带有一个突出的T碱基，插入片段的3’端带有一个突出的A碱基。

4两端加接头




目的：厂家提供的接头都包含有序列已知的barcode区域，以方便测序完成后对数据进行拆分。这些接头按barcode序列进行编号，所以在进行接头连接这一步实验操作的时候，要特别小心不要把barcode编号与样本之间的对应关系搞错。

另外，不同的应用，其接头在序列和结构上都有可能不一样。比如SR测序与PE测序，它们的接头和flowcell都不一样，不能混用。

5连接产物纯化

目的：选出完整的连接产物，去除残缺不全的副产物

方法：割胶回收；磁珠纯化

6PCR富集

目的：增加文库量，方便上级测序；提高完整片段文库所占比例

注意：此步可省略，因为PCR会引入数据偏倚率，若不喜欢，可省略，称为PCR-free

7过柱磁珠纯化

8文库质检

lAgilent2100Bioanalyzer：测定文库片段长度及长度分布；

lqubit或其他设备：测定浓度；

l琼脂糖凝胶电泳；

Qubit只取其测定的重量浓度(ng/uL)；2100只取其测定的文库片段长度。二者结合，计算文库的摩尔浓度；琼脂糖凝胶电泳用于观察文库的整体情况，片段长度是否符合预期，片段长度分布情况，是否有杂带，是否有引物二聚体或接头二聚体残留等等。如果有二聚体残留，则进行纯化。

结合三者数据，计算文库摩尔浓度，将文库统一稀释到平台要求的浓度

根据项目不同需要将文库混合？？不同的barcode的文库不要混合想，一旦混合，将无法分开




CClusterGeneration

使用cbot仪器高度自动化，无需人工干预，4小时

MiSeq、快速HiSeq2500等少数几种型号的测序仪上也能进行

步骤：文库模板杂交、桥式PCR、线性化、末端封闭和测序引物杂交

FC（flowcell）准备就绪后，可以拿到测序仪上真的开始测序了。

注意：clustergeneration最好在测序前先进行。Cluster完成后，越快测序越好。

为满足集团公司优质客户的广泛生物材料使用需求，公司长期以来提供国际小众品牌的代采购增值服务。经过多年的经验积累和客户反馈，已经建立了成熟完善的国际采购业务平台，美东美西两大合作集货点，自有快速审批和进出口通道。现将此服务开放给广大经销商合作伙伴和全国科研工作者，致力于缩短中国与国际一线研发的差距。

至今合作品牌多达300个以上，以下为部分合作品牌摘选

A:  ABBiosciences、ABPBiosciences、aldevron、Almac、AltogenBiosystems americanBIO、Amsbio、ANPTechnologies、AntibodySolutions、Arrayit、ARENACHEMICAL、A.COSTANTINO

B：Bel-Art、BGSC、BrooklynTool、Biomatrica、Biopredic、BioControl、BioGenes

C：CTechnologies、CentralDrugHouse(P)Ltd、ChemScence、CHEMTRADE、CompTech、CoriellInstitute、CreativeBiolabs、Computype、Craic

D：D&Mcontinuous、DiAgam、DiamondMaterials、DocuSign、Dravon、DesertKing

E：EdgeBio、EMCmicrocollections、ENVAIR、EXCELScientific、EMCmicrocollections

F：FaucetQueen、FinaBio

G：G&PBiosciences、Globe、GLOGERM、glycosynth

H：hellobio、HENKE-SASSWOLF、HigginsAnalytical、HJ-BIOANALYTIK

I：IvyFineChemicals、Invitek、InycomBiotech、iQBIOSCIENCES

J：JCRBCellBank、

K：Kerafast、KOAMTAC

L：LABBIO、LCLabs、LigaTrap、Lighthousedata、LPITALIANA、Lumafluor、LYTICSOLUTIONS

M：Medkoo、Maddak、MIMETAS、MiTeGen

N：NeuroProb、NextGene、nippongenetics、NORTHWESTANALYTICS、NovaBioAssays、NU-CHEKPREP

O：OrbitalBiosciences、OXITENO

P：PAR、PyMOL、Pharmaffiliates、Panagene、PelFreez、PFEnex、Polylc、ProliantBiologicals

R：Riken、RANKIN、Ratiolab

S：SRL、SPDScientific、Sanquin、Sbio、ScarabGenomics、Simport、SOVICELL、Starnacells

T：TSC、Toweropticalcorporation、TwistDx、TEKnova、Transposagen、Tribioscience、TriLink

U：Ultivue

X：ximbio

Z：Zymesci

特殊类别

细胞：Riken、JCRBCellBank、Kerafast、

软件：DocuSign、GraphPad、PyMOL、Craic、NextGene、Lighthousedata

进口流程

（此处以Amsbio为例，实际不同品牌不同产品类型所涉及流程稍有不同）

免责申明

1.    本公司并非以上各个品牌在中国区代理商，仅提供产品代理采购业务。

2.    本公司承诺所采购产品来自品牌厂家，并可提供相关进口证明。

3.    本公司保证全程采用官方指定运输条件进行产品运输。

4.    本公司对所委托进口产品品质不做任何担保，如遇质量问题，本公司可协助客户与品牌方进行协商处理售后问题。

5.    本公司因仅负责产品代购，因此不做任何技术支持，如采购，我们会提供产品相关的网页链接，可自行查看和下载产品相关的所有信息和技术资料。

代采服务咨询

如您有海外代采需求，请通过如下任意方式联系我们，并告知产品相关信息，我们将会在24小时之内和您联系。

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苏州蚂蚁淘生物科技有限公司简介

依托于集团公司深厚的资源和超过400家国内优质客户群体，生命科学领域一站式供应链体系，以及高风险生物材料进出口平台的优势，蚂蚁淘生物严格筛选国际创新且经过同行验证过的产品和技术，引入中国市场，开发、孵育和推广。

自公司成立以来，与海外一线品牌建立了长期的交流与合作关系，其中包括多家国际著名细胞和菌种保藏中心。仅2019年内，蚂蚁淘生物接受国内制药企业、科研机构、检测机构和大专院校等单位的委托，从近150个品牌引进各类生物试剂，其中不乏包括细胞株，慢病毒，人体组织切片，血液制品等特种试剂。公司与北京中关村联合创新（绿通北平台）建立了长期的交流与合作关系，可为国内客户提供进口代理业务，完成一站式前置审批、风险评估、检疫审批、清关查验、物流仓储等工作。

本公司特殊物品进口业务，严格遵守国家相关政策和法规流程，致力于为各单位提供更安全、更专业、更便捷的服务。