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Life Technologies细胞内离子测定产品

LifeTechnologies提供了用于细胞功能和健康检测的各种试剂。其中许多分析以荧光或比色法为基础,具有灵敏性、便利性和安全性。这些产品已经过多种仪器平台验证,包括显微镜流式细胞仪酶标仪和高内涵筛选,能够实现各种细胞功能的分析:

 

a.细胞活性和细胞毒性b.细胞增殖和细胞周期c.细胞凋亡d.自噬e.氧化应激f.内吞作用和吞噬作用g.细胞内离子     本文为大家介绍细胞内离子的产品。   离子通道为药物的研发提供了重要机遇,可以靶向各种治疗领域,包括神经、心血管和肺部疾病、疼痛及炎症。要解决各种目标细胞背景中最复杂的离子通道靶点,研究人员需要能满足其研究要求的各类优化的分析。LifeTechnologies基于细胞的离子通道分析产品系列具有灵敏、易用和分析灵活等优点。

图1FluxOR™检测原理。在静息细胞中,加载了FluxOR™染料的本底荧光很低(左),直到钾离子通道被激活。当Tl随着刺激物一起加入时,可激活染料(右)。

产品特点:◈通道特异性:在电压和配体设门的钾离子通道中测定离子流◈快速:高通量检测钾流◈方便:通过BacMam技术高效、无病变转导hERG;可随时冻存转导的细胞◈药理相关:已知阻断剂显示剂量依赖的抑制作用

 

货号产品名称应用规格F10016FluxOR™ Potassium Ion Channel AssayHCS;IF10 microplatesF10017FluxOR™ Potassium Ion Channel AssayHCS;IF100 microplatesB10332BacMam Kv1.3 Ion Channel Reagents 1 kitB10333BacMam Kv2.1 Ion Channel Reagents 1 kitB10334BacMam Kir1.1 Ion Channel Reagents 1 kitB10019BacMam-hERG Potassium Channel Kit 1 kit

 

  钙离子指示剂在与钙离子结合后,可使荧光强度增强。Fluo-3是目前最常用的一种钙离子荧光指示剂,可用于荧光显微镜、高通量检测等。Fluo-3AM是Fluo-3的一种乙酰甲酯衍生物,通过培养,能够轻易进入细胞中,被细胞内的酯酶剪切形成Fluo-3,从而被滞留在细胞内。Fluo-4是Fluo-3的类似物,但比Fluo-3更明亮、光稳定性更好。Fluo-5F、Fluo-5N和fluo-4FF是Fluo-4的类似物,具有较低的钙离子结合力,适合于检测1μM–1mM的胞内钙离子水平,在这个浓度范围内,Fluo-3和Fluo-4与钙离子的结合通常已经饱和。此外,LifeTechnologies的Fluo-4Direct™CalciumAssayKit可抑制培养基产生的背景荧光,而对细胞荧光几乎没有影响。可使用含血清的培养基,无需去除血清。

图2光滑爪蟾卵母细胞注射三磷酸肌醇的非水解类似物后,以Fluo-3作为钙离子指示剂的螺旋状钙流的激光共聚焦成像图片。

 

图3对muscarnic1(M1)受体拮抗剂剂量依赖的钙应答。CHOM1细胞种于多聚赖氨酸包被的384孔板中培养过夜。次日细胞经carbachol、MCN-A-343、ethanechol、oxotremorine和pilocarpine刺激后,使用Fluo-4Direct™CalciumAssayKit测定钙应答。相对荧光强度为最大应答减去最小应答后,除以最小应答。

 

货号产品名称应用Ex/Em规格F1240Fluo-3, Pentaammonium Salt, cell impermeantHCS;IF;M506/5261 mgF1241Fluo-3, AM, Calcium IndicatorHCS;IF;M506/5261 mgF1242Fluo-3, AM, Calcium IndicatorHCS;IF;M506/52620x50 µgF14218Fluo-3, AM, cell permeantHCS;IF;M506/5261 mlF14242Fluo-3, AM, Calcium IndicatorHCS;IF;M506/52640x1 mgF23915Fluo-3, AM, FluoroPure™ gradeHCS;IF;M506/52610x50 µgF14201Fluo-4, AM, cell permeantHCS;IF;M488/53010x50 µgF14202Fluo-4 AM - Packaged For High-Throughput ScreeningHCS;IF;M488/5305x1 mgF14217Fluo-4, AM, cell permeantHCS;IF;M488/530500 µlF23917Fluo-4, AM, FluoroPure™ grade - Special PackagingHCS;IF;M488/53010x50 µgF36205Fluo-4 NW Calcium Assay KitM488/530100 microplatesF36206Fluo-4 NW Calcium Assay KitM488/53010 microplatesP10020PowerLoad™ Concentrate, 100XHCS;IF;M488/5305 mlF10471Fluo-4 Direct™ Calcium Assay KitHCS;IF;M488/53010×10 mlF10472Fluo-4 Direct™ Calcium Assay KitHCS;IF;M488/5301 ×100 mlF10473Fluo-4 Direct™ Calcium Assay KitHCS;IF;M488/5301 ×1 L

氯离子通道参与多种重要的生理功能,包括跨上皮的离子转运、细胞电兴奋性和离子稳态。氯离子通道功能受损会引起很多慢性疾病,因此它们也是药物靶标。为了方便测定氯离子通道活性,LifeTechnologies开发了荧光蛋白的生物传感器Premo™HalideSensor。

      特点:◈ 氯离子通道特异性:以电压和配体设门的氯离子通道和转运子进行功能检测。◈ 快速:高通量测定氯离子流,重复性高◈ 信号强:高表达,无需洗涤◈ 方便:通过BacMam技术即可将Premo™HalideSensor有效无毒性地转入细胞    图4Premo™HalideSensor检测技术。

 

货号产品名称应用Ex/Em规格P10229Premo™ Halide SensorIF515/5301 kit

电压敏感探针(VSPs)是基于荧光共振能量转移(FRET)的电压感应检测技术,用于测定细胞膜电位的变化。

特点:
◈ 高通量:一天可检测32000个样本
◈ 灵敏度高:精确地检测到1%的EmissionRatiopermV变化
◈ 快速检测应答:次秒响应时间
◈ 比率计读数:减少孔与孔之间、染料加载、温度波动等引起的实验误差
◈ 应用广泛:可用于检测任何可改变膜电位的靶标

 

货号产品名称规格K1016Voltage Sensor Probes Set, DiSBAC2(3) and CC2-DMPE1 mgK1046Voltage Sensor Probes Set, DiSBAC4(3) and CC2-DMPE1 mgK1019VABSC-1 Dye (Voltage Assay Background Suppression Compound)1 gK1017CC2-DMPE (voltage sensor probe)1 mgK1070CC2-DMPE (voltage sensor probe)10 mgK1018DiSBAC2(3)1 mgK1021DiSBAC2(3)5 mgK1047DiSBAC4(3)1 mgK1022DiSBAC4(3)5 mg


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