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各种细胞免疫检测方法比较

类型检测名称检测方法主要特点
体内功能检验皮下注射抗原或者负载抗原的DC,观察红斑、硬块的发生与大小优点:体内功能性检验,相对比较容易操作;使用针对T细胞受体(TCR)可变区的流式抗体来对表达特定可变区的T细胞计数优点:可以提供关于可变区使用的群体分布;用PCR的方法扩增T细胞受体互补决定区3的序列,测序特点:简单灵敏,但还不能用于群体分析;抗原与待测PBMC混合,通过ELISPOT检测阳性细胞频率优点:灵敏度最高,单细胞水平,特异性强,结果直观可信,成本低,高通量;淋巴细胞增殖试验(3H胸苷掺入法)待测PBMC、辐射过的APC、抗原混合孵育,特异性的T细胞增殖,通过掺入的3H胸苷来确定增殖水平优点:是传统方法,研究比较透彻;细胞内细胞因子染色法抗原与待测PBMC混合,把细胞因子保留在细胞内,然后用流式抗体染色、计数优点:单细胞水平,可以同时检测多个参数、多种因子;细胞因子ELISA法抗原与待测PBMC混合,然后用定量ELISA法测量细胞受刺激而分泌到上清液中的细胞因子浓度优点:特异性强,可以对细胞因子浓度定量,有以全血作为检测样品的潜力;通过定量RT-PCR方法检测受刺激的细胞中细胞因子mRNA的水平优点:有利用各种组织样品的潜力,灵敏度高,高通量;CTL杀伤法(51Cr释放法)制备51Cr标记的表达抗原的靶细胞,与待测PBMC混合,通过51Cr释放来确定靶细胞被杀伤的水平优点:最直接的功能性检测;极限稀释计数CTL法待测PBMC稀释到一系列孔中,体外增殖,然后加入靶细胞判定每孔裂解的阴阳性,最后通过泊松统计法确定CTL极限稀释倍数优点:对CTL的频率计数比直接CTL杀伤法更准确,灵敏度也有所提高;北京生物公司:Jackson公司Streptavidin链霉亲和素产品介绍2013年美国vector公司最新产品CalBioreagents公司诊断试剂原料产品表梅毒重组抗原:梅毒诊断试剂原料CellBiolabs公司磷酸化蛋白WB实验的封闭试剂eBioscience公司流式高通量多因子检测Millipore公司的Milliplex多因子检测技术ProImmune公司五聚体结合胞内细胞因子染色的应用bio-equip.com

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