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Murine RNase Inhibitor(40 U/µl) 鼠源RNase抑制剂

MurineRNaseInhibitor(40U/µl)
鼠源RNase抑制剂
产品信息
产品名称产品编号规格储存价格(元)
MurineRNaseInhibitor(40U/µl)鼠源RNase抑制剂10603ES052KU-20℃216.00
MurineRNaseInhibitor(40U/µl)鼠源RNase抑制剂10603ES1010KU-20℃916.00
MurineRNaseInhibitor(40U/µl)鼠源RNase抑制剂10603ES2020KU-20℃1695.00
MurineRNaseInhibitor(40U/µl)鼠源RNase抑制剂10603ES60100KU-20℃11865.00
产品描述
RNase抑制剂(RNaseinhibitor)是存在于人的胎盘中一种特异性核糖核酸酶(RNase)抑制剂,其特异性失活RNase的原理是:与RNase以非共价键结合形成复合体,造成RNase失活。
本产品是以可溶形式在大肠杆菌中表达纯化的重组鼠源RNase抑制剂,能够广泛抑制各种类型RNase(RNaseA,B,C)。经RT-PCR、RT-qPCR检验,本产品能与HieffTM Ⅰ ReverseTranscriptase(货号:10101)、M-MLV(H-)ReverseTranscriptase(货号:10105)以及各种DNAPolymerase兼容。与人源RNaseinhibitor相比,本产品不含人源蛋白中的两个对氧化非常敏感的半胱氨酸,因而具有更高的抗氧化活性。同时,更加适合于对高DTT敏感性实验(如qPCR等)。
本产品可用于CDNA第一链合成、多核糖体的分离(Polysomeisolation)、体外转录和体外无细胞翻译系统等实验。
运输与保存方法
冰袋运输。产品-20℃保存。有效期2年。
活性定义
抑制5ngRNaseA活性的50%所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。RNaseA活性通过水解Cyclic2",3"-CMP生成3"-CMP定量求得。
质量控制
核酸外切酶残留检测:200U本品和0.6μgλ-HindIII在74℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
核酸内切酶残留检测:200U本品和0.6μgSupercoiledpBR322DNA在74℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
大肠杆菌残留DNA残留检测:50μl体系中,加入200U本品,以ddH2O为模板,扩增E.coli16srDNA基因。35个循环后进行1%琼脂糖凝胶电泳,EB染色,无扩增条带。
应用实例(逆转录实验)
1.在RNasefree离心管中配制如下混合液
组分体积(μl)
RNasefreeddH2Oto20
5×HieffTM Buffer4
Oligo(dT)18 (50μM)1
dNTPMix(10mMeach)1
RNaseInhibitor(40U/μl)1
HieffTM Ⅰ ReverseTranscriptase(200U/μl)1
模板RNATotalRNA:50ng-5μg
2.轻轻混匀。
3.50℃ 45min,70℃ 15min。
4.产物于-20℃保存。
注意事项
1.本品抑制RNase活性的pH值范围较广,在pH7~8时表现最大活性。
2.避免起泡或剧烈搅拌、涡旋等操作,以防止本品失活。
3.本品不抑制RNaseH活性。
4.为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
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