2012年12月31日pull-down试剂盒说明书翻译 Pierce生物素化蛋白互作Pull-Down 试剂盒 捕获纯化与生物素诱饵蛋白互作的蛋白 Pierce 生物素(酰化)蛋白互作Pull-Down 试剂盒包含...
2014年6月30日Elabscience生物素标记试剂盒提供了生物素标记所需全部试剂,用于含有氨基(NH2-)抗体的标记。生物素已经活化,可直接使用,每个试剂盒足以完成3次标记,每次可标记0...
针对Pierce26149的中文说明书,翻译不对的地方请大家谅解! Pierce? Co-Immunoprecipitation (Co-IP) Kit(26149) 中文说明书介绍: Thermo 公司的 Pierce?免疫共沉淀试剂盒,可通...
1Pierce®Co-Immunoprecipitation(Co-IP)Kit(26149)中文说明书介绍:Thermo公司的Pierce®免疫共沉淀试剂盒,可通过将铆钉抗体固定在琼脂糖支撑物上,从裂解液中或其他复杂混合物中,分离出天然蛋白复合物。Co-IP是一种研究蛋白与蛋白相互作用通用的方法,该方法使用一种诱饵蛋白与抗原进行免疫沉淀反应,然后可通过免疫共沉淀任何与诱饵蛋白具有相互作用的猎物蛋白。传统的Co-IP方法使用蛋白A或G共同洗脱抗体的重链和轻链,这很可能导致将相关的蛋白一起洗脱下来,掩盖一些重要的结果。Pierce®免疫共沉淀试剂盒通过将共价结合抗体固定在一个胺类活性反应树脂上解决了这一问题。该试剂盒包含足够的用于蛋白结合和恢复的缓冲液,完成对照试验的高校离心柱和收集管,这些产品进一步缩短了操作实验的时间。重要产品信息:略Co-IP实验步骤:A.抗体固定注意:以下试验步骤是针对用无胺和其他载体蛋白稀释的10-75μg亲和纯化抗体(参考重要产品信息一节)。根据实际使用比例参考这一协议步骤。参考重要产品信息节表1中的建议抗体用量和树脂体积用量。1.室温平衡胺连接耦合树脂(AminoLink®PlusCouplingResin)和试剂;2.为每个Co-IP反应准备2ml1×CouplingBuffer(超纯水稀释20×CouplingBuffer);
产品介绍:Elabscience生物素标记试剂盒提供了生物素标记所需全部试剂,用于含有氨基(NH2-)抗体的标记。生物素已经活化,可直接使用,每个试剂盒足以完成3次标记,每次可标记0.2-2mg。试剂盒中包括3个用于抗体标记脱盐的Filtration tube,不用透析,操作简便,熟练操作90min可完成整个标记过程。产品特点:1. 试剂全面本试剂盒提供了生物素标记所需全部试剂。2. 快速整个过程仅需90min。3. 方便通过Filtration tube即可脱盐,无需透析或者凝胶过滤。4. 使用灵活既可用于微量标记又可大量标记,每次可标记0.2-2mg。5. 理想的标记效果已经优化,确定了zui适的标记比例,降低由于过度标记而失活的可能性。产品组成:名称规格NH2-Reactive Biotin0.1mg/支 3Labeling Buffer10ml 1DMF500ul 1Filtration tube0.5mg/个 6标记过程需要仪器:1. 10ul,50ul,200ul,1000ul可调高精度移液器2. 恒温箱(37℃)3. 离心机(离心力可达到12,000 g)储存条件:本试剂盒未开封前在2-8℃可稳定保存一年生物素标记反应原理:NH2-Reactive Biotin专一的与伯胺反应(N-末端及赖氨酸残基侧链)形成稳定的酰胺键操作过程:实验前准备:1.仔细阅读使用说明书。2.计算待使用NH2-Reactive Biotin的量。3.提前20min从冰箱中取出试剂盒,平衡至室温(注:不需要用到的NH2- Reactive Biotin继续放置冰箱中)。4.溶解NH2-Reactive Biotin:加入30ulDMF至NH2-Reactive Biotin瓶中,静置10min,待其充分溶解,此时生物素的浓度为10mM。操作步骤:(本操作步骤按照1mg的量进行标记)1.取1mg待标记抗体于Filtration tube中,并加入相应体积的Labeling Buffer,使抗体的终浓度为2mg/ml,12,000 x g离心10min。(注:①Filtration tube的zui大体积为0.5ml②待标记抗体浓度低时,可先超滤离心一次)2. 加入13.3ul NH2-Reactive Biotin 和适量Labeling Buffer至上述Filtration tube中,使终体积为0.5ml,并轻轻吹打混匀。放入37℃恒温箱中避光温育30min。12,000 x g离心10min。3. 加入适量Labeling Buffer至上述Filtration tube中,使终体积为0.5ml,并轻轻吹打混匀,12,000 x g离心10min。4. 操作3重复一次。5. 加0.2ml Labeling Buffer至Filtration tube中,轻轻吹打。将滤芯倒转放置于另一个离心管中,6,000 x g离心10min。6. 收集离心管中的溶液,即为生物素标记的抗体。注意事项:1.本试剂盒也可标记其它含有氨基(NH2-)的抗原、HRP、多肽,具体标记比例根据待标记物中氨基的数量确定。2. DMF要密封干燥保存,使用完立即用封口膜封紧。3. 操作步骤5中,可用Labeling Buffer作为回收标记抗体的缓冲液,也可使用其它任何缓冲液或保护剂。4.本试剂盒未开封前的有效期为一年,请在有效期内使用。5.本试剂盒提供的为10KD的Filtration tube,标记抗原或多肽请注意分子量的大小。6. 在步骤2中,标记其它抗体时,我们应先控制抗体的终浓度为2mg/mL,然后再根据抗体的量计算应加入NH2 - Reactive Biotin的体积。 关注本网官方微信 随时阅读专业资讯
茉莉 分享于2012-12-31 19:45 pull down试剂盒说明书翻译pull,down