快速高尔基染色试剂盒（神经元和胶质细胞）

Golgi-Cox浸染法是研究神经元和胶质细胞正常和非正常形态最有效的方法之一。使用Golgi技术，在药物处理过的动物脑中和因神经疾病死亡的病人脑中发现了神经树突和树突棘微小的形态改变。然而Golgi染色法不可靠且费时，成为这种方法广泛应用的障碍。

FDRapidGolgiStain^TM Kit(FD快速Golgi染色试剂盒)是根据Ramon-Moliner,Glaser2和VanderLoos5所阐述的方法的原则设计的。这个试剂盒不仅极大改进并简化了Golgi-Cox技术，而且被证实在显示神经元和胶质细胞，特别是树突棘的形态细节上极为灵敏可靠。FDRapidGolgiStain^TM Kit已被广泛测试并用于数种动物脑及去世病人的脑。

使用步骤：

一、组织制备

 1.杀死动物之前对实验动物进行深度麻醉。应尽快地从颅骨中取出动物的脑（或死去病人的脑），但操作时必须非常小心以免损伤或压迫组织。

  2.用双蒸水或Milli-Q水快速冲掉组织表面的血液。

3.把组织浸泡在由溶液A和B等体积混合的浸渍液中，室温下黑暗保存两周。浸泡6个小时以后或次日更换新的浸渍液。

4.转移组织到溶液C中室温黑暗至少72小时（可长达1周）。24小时后或次日至少更换一次溶液。

5.在-20℃到-22℃的条件下用冷冻切片机将组织切成100-200um厚的薄片。也可用其它型号的显微镜薄片切片机包括滑动切片机和振动切片机。用样本回收器（试剂盒提供）把样本转移到含有溶液C（试剂盒所提供的滴瓶是方便溶液C滴到载玻片上）的明胶包被的显微镜载玻片上。载玻片上多余的溶液用吸管吸走并用滤纸吸干（载玻片上的溶液必须尽可能地吸干否则切片将从载玻片上脱落下来）。切片可以室温下自然风干（不能用电风扇或电热板使其干燥）。为取得最佳结果，应尽快地完成切片，制备好的切片如果保存于载玻片盒中，室温黑暗条件下最长可保存3天。

二、染色步骤

 1.用双蒸水或Milli-Q水冲洗切片两次，每次4分钟。

2.把切片置于由1份溶液D，1份溶液E和2份的双蒸水或Milli-Q水组成的混合液中10分钟。

3.用蒸馏水或Milli-Q水冲洗切片两次，每次4分钟（蒸馏水应频繁更换新的）。

4.用结晶紫或硫堇对切片进行复染（可选步骤）。

5.在50%，75%和95%的乙醇中对切片进行脱水，每个浓度梯度脱水4分钟（不要跳过任何一个步骤）。

6.然后在无水乙醇中对切片进行脱水，4次，每次4分钟（不要延长时间）。

7.在二甲苯中透明，3次，每次4分钟，并且用树脂封片剂对盖玻片进行封片。

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