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CRISPR指导RNA
Edit-R预设计的指导RNA
保证编辑靶基因
合成sgRNA
一份指南格式-非常适合复杂,难以编辑的单元格类型
合成crRNA
适用于大多数细胞类型的有效编辑-必须与合成tracrRNA一起使用
慢病毒sgRNA
对于不适合转染的细胞类型,稳定的指导RNA表达
多合一慢病毒sgRNA
将sgRNA和Cas9表达整合到单个载体中
指导RNA对Cas9核酸酶进行编程以在特定的基因组位置进行切割。有效的指导RNA的设计对于实现有效的基因敲除至关重要。
所有Edit-R预先设计的指导RNA产品均采用经过验证的算法进行设计,以zui大程度地发挥功能性蛋白敲除的可能性,而不仅仅是产生双链断裂。通过评估成千上万个设计的表型,然后在其他分析系统中验证我们的设计规则,我们建立了确定目标位点的标准,这些位点更有可能实现高特异性的功能敲除。
也可以使用CRISPR设计工具为其他物种,替代核酸酶或基因内的任何特定区域定制合成和慢病毒指导RNA。对于使用金黄色葡萄球菌Cas9用于切割的设计指南RNA,地平线建议NEB恩根秀Cas9您核酸。
CRISPR-Cas9系统中的指导RNA
除了表达Cas9核酸酶外,CRISPR-Cas9系统还需要特定的RNA分子来募集核酸酶活性并将其定向到目标区域。这些指导RNA采取以下两种形式之一:
合成的反式激活CRISPRRNA(tracrRNA)加上合成的CRISPRRNA(crRNA),旨在切割感兴趣的基因靶位点(图1a)
由crRNA和tracrRNA组成的合成或表达的单向导RNA(sgRNA)作为单个构建体(图1b)
微小RNA(miRNA)
研究microRNA的功能以及它们与miRNA调节试剂有关的途径。、
预先设计的miRNA调节试剂
miRIDIANmicroRNA模拟物
为功能获得研究补充内源性microRNA活性
miRIDIANmicroRNA发夹抑制剂
抑制miRNA活性以研究功能丧失的影响
shMIMIC慢病毒微RNA
表达的慢病毒microRNA具有多个启动子和报告基因选项
shMIMIC诱导型慢病毒微RNA
业界zui具创新性的成熟microRNA表达系统,结合zui新一代强大的Tet诱导技术
定制miRNA合成
定制的microRNA调节工具
修改现有的microRNA模仿物或抑制剂,靶向新型microRNA,或要求AccellmicroRNA抑制剂或稳定化模仿物用于特殊应用。
microRNA调节简介
miRNA是非编码RNA,可通过一种机制介导转录后基因调控,该机制涉及RISC介导的与哺乳动物靶基因3UTR中互补序列的结合。miRNA通过不完善的序列互补性与靶向信使RNA(mRNA)结合,从而导致mRNA不稳定和翻译减弱。由于转录本的miRNA靶向是通过部分序列互补来指导的,因此每个miRNA都可能调节数百个基因。
在获得功能和丧失功能的实验中,对miRNA水平的调节不仅是了解microRNA功能的方法,也是了解它们可能参与的途径的基本方法。
microRNA模拟
miRIDIANmicroRNA模拟物是化学合成的合成双链RNA分子,旨在模拟Dicer加工产生的内源性双链体。一链代表在miRBase数据库版本21.0中注释的成熟miRNA。使用专有的ON-TARGETplus修改可确保仅将所需的成熟链加载到RISC中。miRIDIANmicroRNA模拟物需要使用类似于siRNA的方法(转染试剂,电穿孔等)递送到细胞中。人类,小鼠和大鼠中的每种miRNA均可使用单独的试剂。预定义的筛选库可用于人类和小鼠。可以通过我们的定制microRNA网络工具订购定制miRNA。在物种可用性,设计标准和添加化学修饰方面提供更大的灵活性。还可以使用Cherry-pickLibraryPlater生成并订购自定义的后光线。
shMIMIC慢病毒microRNA和shMIMIC慢病毒诱导型microRNA构建体是慢病毒载体,其编码天然microRNA序列以实现外源导入的microRNA表达。基于获得专li的SMARTvector慢病毒shRNA平台,它们针对高功能表达进行了优化,并确保链偏向,从而仅加载代表成熟miRNA序列的特异性靶向链。借助SMARTchoice的额外灵活性启动子和报道基因的选择,可以按多种构型订购构建体,以确保获得zui佳实验结果。在miRbase数据库21.0版中,所有人,小鼠和大鼠microRNA的高滴度纯化慢病毒颗粒均可以使用单独的构建体;合并的筛选文库也可用于本构和可诱导形式的人和小鼠。也可以在此处订购定制的筛选库。
microRNA抑制剂
将microRNA抑制剂引入生物系统会导致功能丧失分析,并预测内源性miRNA功能会下降。miRIDIANmicroRNA发夹抑制剂是合成的单链RNA分子,旨在抑制内源性miRNA活性。它们是zui新一代的专有合成抑制剂。正在申请专li的分子结合了化学修饰和全新的二级结构基序,从而增强了效力和寿命。这允许在非常低的纳摩尔浓度下以最小的毒性对多重microRNA进行抑制。在miRBase数据库版本21.0中,可为人类,小鼠和大鼠中的每个成熟miRNA提供单独的试剂。和预定义的抑制剂筛选库适用于人类和小鼠。还可以通过使用Cherry-pickLibraryPlater创建和订购自定义的后灯。
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