Polysciences PEI溶液配制说明书苏州蚂蚁淘实验试剂有限公司

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美国POLYSCIENCES公司成立于1961年，主要生产和经营LIFESCIENCES生命科学（胶体金,不含甲醛的甲醇等），病理学和显镜学微球和粒子和磁珠各种单体和聚体等产品。polysciences公司是世界上zui大zui全的多聚化合物供应商,同时是世界*的免疫学,组织化学试剂耗材供应商.

PolysciencesPEI溶液配制说明书

线性聚乙烯亚胺,#23966,1mg/ml转染试剂的配制

转染试剂线性PEI溶液的配制

聚乙烯亚胺（Polyethylenimine，PEI）是聚乙烯亚胺是一种具有较高的阳离子电荷密度的有机大分子，每相隔二个碳个原子，即每第三个原子都是质子化的氨基氮原子，使得聚合物网络在任何pH下都能充当有效的质子海绵(protonsponge)体。PEI，可用作转染试剂，它可以缩聚DNA分子形成颗粒并转染真核细胞。有实验证明，分子量为25000的线性PEI即Polysciences23966转染效率zui高。

下面将主要介绍polysciences线性PEI(#23966)的产品特性及其溶液的配制过程。

1.产品特性:

产品名称：线性聚乙烯亚胺(PEI)

CAS号

9002-98-6，26913-06-4

分子式

(CH2CH2NH)n

分子量

25000

熔点

73-75C

外观

白色或黄色固体

结构式

溶解性

溶于热水，低pH值的冷水，甲醇和乙醇；不溶于：苯，Ethylether和丙酮

储存

室温

2.溶液配制

此指导说明书是经polysciences公司研究，测试及其客户反馈的后编写的。下面推荐一种简单适用而的方法，讲述如何配制浓度为1mg/mL的转染试剂的配制。

材料：

1g#23966、1L纯水（Milli-Q纯水，注射用水（WFI），或类似的生物级水）、12M盐酸、10M氢氧化钠、一次性0.1-0.2mPES真空无菌过滤器、无菌高聚乙烯或聚丙烯试剂瓶。

器材：

1L玻璃烧杯、1L玻璃量筒、核准pH计、2支1mL塑料移液管、托盘、聚四氟乙烯（PTFE）搅拌棒、真空泵

配制过程：

1g#23966900mL水溶解搅拌、加热（60-80C）加HCl调pH到2.0左右盖上烧杯，搅拌3h（直至粉末完全溶解）冷却至室温加NaOH调pH到6.9-7.1移液到量筒，加水补足至1L真空过滤消毒分装，-20C保存。

备注：加热或加酸都有助于PEI溶解。当然酸可能不用加那么多，详细用量可试加一点搅拌看看，足够溶解就行，不一定需要加到pH那么低。

试剂储存：

冷冻部分溶液可在-20C保存长达一年；部分解冻的溶液可在4C保存2周，不可反复冻融。

粉末储存：

未开封的粉末有效期两年。可在室温下保存直至使用。

参考文献：

1.聚乙烯亚胺（PEI）、线性(1mg/mL).ColdSpringHarborProtocols2008,pdb.rec11323pdb.rec11323(2008).doi:10.1101/pdb.rec11323.

Catalog#23966Polyethylenimine,Linear,MW25000(PEI25K)

TransfectionReagentPreparationandStorageRecommendations

Theseguidelinesareourrecommendationsbasedoffresearch,testing,andcustomerfeedback.Therearealternativemethodsavailable,butwesuggestfollowingtheserecommendationsforeasyadoptionandconsistentlyhighperformance.ThesemethodsareadaptedfromColdSpringHarborProtocols[1],anexcellentsecondaryresourcefortransienttransfectionliterature.

ReagentPreparation(1mg/mL)

Materials:

1.1gPEI25K(PolysciencesCatalog#23966).

2.1LMilli-Qwater,waterforinjection(WFI),orcomparablebiological-gradewater

3.12MHydrochloricAcid(HCl)

4.10MSodiumHydrochloride(NaOH)

5.Disposable0.1-0.2mPESvacuumsterile-filter.

6.SterileHDPEorpolypropylenestoragevialsforreagentaliquots.

Equipment

1.1Lglassbeaker

2.1Lglassgraduatedcylinder

3.CalibratedpHmeter

4.2xdisposable1mLplasticpipettes

5.Stirplate

6.PTFEcoatedstirbar

7.Vacuumpump

Method:

1.Dispense1gofPEI25Kintobeakerandsuspendin900mLofwater.

2.Addstirbarandsetstirringtoproduceasmallvortex.

3.AddhydrochloricaciddropwiseuntilpHis2.0.

4.Covertopofbeakerandstirforupto3hoursuntilpowderfullydissolves.

5.AddsodiumhydroxidedropwiseuntilpHis6.9-7.1.

6.Transfersolutiontograduatedcylinderandaddwateruntilthetotalvolumeis1L.

7.Sterile-filterthroughvacuummembrane.

8.Aliquotasdesiredandstoreat-20C.

ReagentStorage

Frozenaliquotscanbestoredat-20Cforuptooneyear.Aliquotscanbethawedandkeptat4Cforup

totwoweeks,butshouldneverbere-frozen.

PowderStorage

Unopenedpowderhasashelflifeoftwoyearsfromdateofreceipt.Itcanbekeptatroomtemperature

untiluse.

References

1.Polyethylenimine(PEI),linear(1mg/mL).ColdSpringHarborProtocols2008,pdb.rec11323-pdb.rec11323(2008).doi:10.1101/pdb.rec11323

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