Polysciences公司239662停产，替代品239661

2017年年初，Polysciences公司就给各代理经销商邮件通知23966-2停产，替代品23966-1

23966-1跟23966-2的唯一区别就是重量不一样，由原来的2g装变成了现在的1g装，但是价格却涨了不少

目前蚂蚁淘现货充足，价格很好

PEI转染手册

转染操作流程：

 1、细胞传代：

转染前24h内分离293T细胞至含10％胎牛血清的DMEM培养基中进行传代培养，接种密度如下：

     6孔板：0.5x106细胞

     10cm培养皿：4.0x106细胞

     15cm培养皿：9.0x106细胞

2、转染

转染前将所有试剂置于室温。

2.1质粒DNA的稀释

在无菌试管中，用无血清的DMEMW/O酚红培养基（浓度为10％）稀释质粒DNA（ug）。病毒包装体（psPAX2）：病毒包膜（pMD2G）和重组质粒DNA的稀释比例分别为4:2:1。

6孔板：200ul+3ug的DNA

    10cm培养皿：1ml+7-8ug的DNA

    15cm培养皿：2ml+11-12ug的DNA

  2.2转染复合体形成

将PEI（1ug/uL）加入已稀释的总DNA中，PEI与DNA（ug）的混合比率为3:1。加入后立即涡旋混合。

 6孔板：9ulPEI复合体（1ug/ul）=9ug

    10cm培养皿：21ulPEI复合体（1ug/ul）=21ug

    15cm培养皿：33ulPEI复合体（1ug/ul）=33ug

将添加到细胞的DNA/PEI的混合物在室温下孵育15分钟。

4、收获转染细胞

转染后48小时内收获转染细胞/或病毒上清。

试剂的配制：

PEI（1ug/ul）Polysciences（CAT＃23966-1配制成储液：)

1、将无内毒素的无菌水加热至80℃左右溶解PEI，冷却到室温。

2、调整pH值至7.0，用0.22um的滤器过滤消毒，分装后储存在-20℃。工作液可保持在4℃