细胞永生化服务的功能:
灵活性:选择不同的永生化方法,包括表达猿猴病毒40(SV40)T抗原的重组慢病毒和人端粒酶逆转录酶(hTERT)。
无风险:在永生化不成功的极少数情况下,我们提供100%的人工退款。这使您可以无风险地试用我们的服务。
表征:对转基因表达进行PCR分析。
时间轴: 2-5个月,具体取决于永生化方法,源细胞和物种。
可交付成果:我们提供5瓶永生化的合并细胞和/或单个克隆细胞(> 1 x 10 6个细胞/小瓶)。
申请表格:
注意:我们需要客户提供的以下材料来进行永生化项目:
客户所需的单元格,
2个典型存储大小的小瓶,
指示适当的生长培养基和条件。
如果您的细胞需要除DMEM和RPMI以外的培养基,我们将需要1-2升培养基以及该项目适用的任何生长因子。另外,如果细胞需要经过特殊处理的培养皿,请提供带涂层的6孔板和T25烧瓶。
保证:在极少数情况下无法成功进行编程的情况下,ALSTEM对项目总额具有独特的100%退款政策。这使您可以无风险地试用我们的服务。
接受多种供体细胞类型:我们已经成功地从成纤维细胞,PBMC,CD34和LCL生成了iPSC;
尖端技术:我们提供无馈线,非集成式重新编程;
灵活的重编程方法:我们提供附加型和逆转录病毒iPSC重编程;
交付物的多种选择: ALSTEM旨在提供5个来自不同菌落的iPSC小瓶(> 2 x 10 ^ 5个细胞/小瓶);
短期: 2-3个月,取决于重新编程的方法,源细胞和种类;
iPSC表征:多能性标志物Oct4和TRA-1-60的AP染色和免疫染色;
其他“附加”服务:基因组编辑,畸胎瘤形成,胚状体形成,核型分析和进一步鉴定;

Alstembio原代细胞通常在培养中只能经历有限数量的细胞分裂,然后进入复制衰老,在那里它们不再分裂。科学家需要经常从组织中重建新鲜的培养物,这可能是乏味的,并且会增加从一种制剂到另一种制剂的变异性。来源于原代细胞的永生化细胞可以超过正常的细胞衰老并具有扩展的复制能力。永生化细胞更易于培养和维护,因此对细胞生物学的研究非常有用,从而使科学家能够通过研究项目使用相同的一致细胞进行纵向研究。
存在几种在培养条件下使哺乳动物细胞永生化的方法。猿猴病毒40(SV40)T抗原可以在受感染的细胞中诱导端粒酶活性,并且已被证明是使许多不同细胞类型永生化的最简单,最可靠的药物。细胞永生化的最新发现方法是通过表达端粒酶逆转录酶蛋白(TERT)。这种方法对于受端粒长度影响最大的细胞(包括许多人类细胞类型)特别有用。在大多数体细胞中,TERT通常是沉默的。这些细胞可以通过在外源引入hTERT时保持足够的端粒长度来避免复制性衰老。但是,在某些细胞类型(特别是在上皮细胞中)中hTERT的过表达不能诱导细胞永生化。
Alstem同时提供SV40和hTERT细胞永生化套件,请参阅下面的订购信息。
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Thermofisher旗下Gibco培养系列、ABI细胞计数仪及PCR仪、Invitrogen分子生物学试剂及Qubit3.0、Ambion的RNA相关试剂、Molecular probes试剂、Pierce蛋白相关试剂盒、Nanodrop One/OneC;Parafilm封口膜;Viskase透析袋;Sigma-Aldrich试剂;AccuStandard 标准品;Millipore抗体;Glen Research 核酸合成试剂;Bio-Rad电泳仪及PCR仪;Nanocs的PEG聚合物; Chromotek羊驼抗体; Polysciences转染试剂; Echelon-inc 脂类研究试剂盒; R&D Systems抗体及Elisa试剂盒; Jackson二抗及封闭血清; Biotium 荧光染料;NEB内切酶及NGS相关产品; Athens Research & Technology人类蛋白及抗血清; Illumina二代测试试剂盒; Tocris 小分子试剂; TwistDx恒温扩增试剂盒(RPA); Enzymatics二代测序酶;Novus抗体及Elisa试剂盒;AG scientific潮霉素B、放线菌酮、G-418;Plantmedia植物培养系列及抗体;Agilent 2100生物分析仪;Biolog耗材;Biomatik的Elisa试剂盒;Covaris基因打断仪;CST抗体;Dharmacon的siRNA产品。