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Biothema萃取剂B / S 100 mL

1613 SEK


100 mL试剂,用于从细菌和哺乳动物细胞中提取ATP。

提取剂B / S用于从细菌和哺乳动物细胞中提取ATP。它是一种强力提取剂,适用于所有细菌细胞和大多数其他类型的细胞。它迅速中和所有的ATP酶。为避免萤光素酶降解,应在稀释剂B中重构ATP试剂以中和萃取剂。



Biothema的Cell Viability Kit SL通过确定总ATP(三磷酸腺苷)用于细胞增殖和细胞毒性研究。试剂盒中包含的萃取剂B / S可从大多数类型的细胞释放ATP,并使ATP降解酶失活。为了获得最大的准确性,细胞外ATP的水平应低于细胞内的水平。由于细胞数量少,ATP降解酶不是问题,并且155-050细胞ATP试剂盒HTS可以用于哺乳动物,但不能用于微生物细胞。该试剂盒仅需一个步骤即可进行混合测量(Cell Viability Kit SL需要两个步骤–首先是提取,然后是光测量)。如果需要更高的灵敏度或对细菌样品有敏感性,建议使用266-311 ATP生物质试剂盒HS,266-111细胞内ATP试剂盒HS或266-311微生物ATP试剂盒HS。

Cell Viability Kit SL可用于定量10 -11 – 10 -7 mol / L 范围内的ATP 。该动态范围涵盖了常用的接种细胞数量和培养基。

所有活细胞都包含ATP,在不同细胞过程之间,ATP扮演着能量交换的角色。当细胞死于自然原因时,ATP通常会降解。在所有类型的细胞中,ATP的细胞内浓度都经过精心调节至相似的水平。因此,ATP是细胞内总体积的良好估计。大多数细菌细胞含有约 每个细胞2×10 -18 mol ATP,而大多数真核细胞由于其较大的尺寸而含有10 -15 mol ATP或更多。



BioThema开发了三种类型的ATP试剂66

  1. 衰减速率<1%/ min(非常类似于Bio-Orbit Oy不再提供的ATP监测试剂)的ATP试剂SL(稳定的光)。当这些试剂加入到其中,ATP形成或降解的ATP浓度可以通过测量光发射连续监测的反应混合物9,10,21,22,32,34,43,44,49,64,66,67 ,69,72ATP试剂SL也可以用来测量ATP在含有例如20飞摩尔/细胞培养的真核细胞作为测定法的线性范围是1-50.000细胞31,36,37,40,59

  2. ATP试剂HS(高灵敏度),衰减速率约为10%/ min。该试剂的活性是ATP试剂SL的20倍,主要用于检测低水平的细菌。细菌细胞每个细胞含有约1 amol ATP。使用ATP试剂HS,可以检测到约10个细菌细胞对应的10 amol ATP。使用良好的发光计,线性范围为10-100.000 amol ATP。当将比色皿放在光度计中并测量光信号时,只需几秒钟即可将该试剂手动注入样品中72

  3. ATP试剂SS(超敏感),衰减速率约为235%/ min,其荧光素酶是ATP试剂SL的235倍。1分钟后,仅剩下10%的光。这意味着必须将试剂注入样品中以捕获信号。该试剂的检测极限是<1 amol ATP(Berthold检测系统,应用说明2010/10。在这种ATP水平下,人们会在移液器吸头,微孔板和其他任何地方发现ATP污染。仅当真正高灵敏度时才应使用此试剂。需要72

光信号通常以相对光单位(RLU)表示。这些单位在仪器,试剂和样品基质之间以及温度为72时变化因此,有必要在添加已知量的ATP标准品之前和之后通过测量光信号来校准每个化验。BioThema具有一系列经认证的液体稳定的ATP标准68应当以小体积(10 µL)添加它们,以保持反应条件不变。该量应至少为样品中ATP量的10倍。以这种方式使用ATP标准品可以补偿所有类型的分析干扰,并且始终可以获得正确的结果。如果您参考的是ATP标准曲线,则情况并非如此,因为样品基质可能会产生干扰,样品温度也会变化72

上面的ATP试剂和ATP标准品与各种其他试剂结合在一起可用于特殊目的的许多试剂盒中。这些试剂包括:

  1. ATP消除试剂,用于在确定细胞内ATP时降解细胞外ATP。

  2. 细胞裂解试剂,用于裂解体细胞,不影响细菌细胞。

  3. 用于从细菌和体细胞释放腺嘌呤核苷酸的萃取剂B / S。

  4. 萤光素底物和ATP底物,用于萤火虫荧光素酶的测定。

  5. D-荧光素(游离酸,钾盐和钠盐)在体内成像71



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