EnoGene Cell Counting Kit8 (CCK8)细胞活力检测试剂盒

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货号	产品名称	规格	价格	促销价	库存
CK04	CCK-8试剂盒(同仁化学)	500T	850		现货
CK04	CCK-8试剂盒(同仁化学)	100T	350		现货

CCK8法与其他细胞增殖/毒性检测方法的优势比较

检测方法	MTT 法	XTT 法	WST-1 法	CCK8 法
甲臜产物的水溶性	差（需加有机溶剂溶解再检测）	好	好	好
产品性状	粉末	2 瓶溶液	溶液	1 瓶溶液
使用方法	配成溶液后使用	现配现用	即开即用	即开即用
检测灵敏度	高	很高	很高	高
检测时间	较长	较短	较短	最短
检测波长	560-600nm	420-480nm	420-480nm	430-490nm
细胞毒性	高，细胞形态完全消失	很低，细胞形态不变	很低，细胞形态不变	很低，细胞形态不变
试剂稳定性	一般	较差	一般	很好
批量样品检测	可以	非常适合	非常适合	非常适合
便捷程度	一般	便捷	便捷	非常便捷

产品描述：
CCK-8用途：药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验
CCK-8试剂盒在国内知名科研院所、重点大学、三甲医院被广泛应用，国际认可度高，使用CCK-8发表的中外文献达600多篇，
其中截止08年底SCI影响因子IF＞10分的论文有37篇，最高IF38.5分
[Heterozygosity with respect to Zfp148 causes complete loss of fetal germ cells during mouse embryogenesis,Nature Genetics 33, 172 - 176 (01 Feb 2003)]
 CCK-8试剂与MTT等方法灵敏度比较
 CCK-8试剂毒性：CCK-8和其他检测方法对比可以得出——CCK-8对细胞几乎无毒性，不伤害细胞，细胞可重复利用
 保存条件：4℃避光保存一年有效。-20℃下避光可以保存2年。如需要长期保存，推荐在-20℃储藏。


CCK-8细胞增殖毒性检测试剂盒
CCK-8细胞活力测定试剂根据经科专有配方配制
同等用量下的显色与日本同仁CCK-8试剂效果相当
明显高于国内某知名品牌产品。

日本同仁CCK8     500T      800元
上海经科CCK8     500T      380元

（上海经科的CCK8 和 日本同仁的CCK8 质量相当）
 
试剂测定原理
1. CCK-8试剂检测细胞活力，可用于细胞增殖和毒性分析，方法简便而准确。其基本原理为：该试剂中的WST–8与MTT类似，在电子载体1-甲氧基PMS的作用下，被细胞线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的橙黄色甲臜染料（Formazan），甲臜的生成量与活细胞的数量和活力成正比，因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。

试剂的优点
1、结果准确，重现性好  试剂不影响细胞活力，显色产物直接溶解于培养液，直接测定OD值即可准确反应细胞活力。
2、操作省时简单  试剂即开即用，无需配制；只需一步操作，即可测定。
3、安全性好  不含放射性同位素和有害有机溶剂，使用安全。
4、灵敏度高  灵敏度高于MTT、XTT和MTS等方法

使用方法
1、使用96孔板，细胞培养和处理完毕。
2、迅速加入CCK-8试剂，每孔10μl。
3、培养板放回培养箱，37℃孵育1~4小时。
4、于450nm处测定OD值。
5、结果分析  将各测试孔的OD值减去对照孔或调零孔OD值。各平行孔的OD值取平均数。
细胞活力% = （加药细胞OD-空白OD）/（对照细胞OD-空白OD）×100%
6、若使用96孔外的培养板，试剂用量等比例增减

使用注意事项
1、首次使用时，建议先做几个孔摸索条件，考察接种细胞的数量和加入CCK-8试剂后的培养时间。
2、加入试剂速度要快，以避免试剂残留和加样速度不一所致反应时间不同造成的显色误差。有条件的情况下，建议采用多通道移液器，可以减少平行孔间的差异。为避免枪头上的残留所带来的加样误差，CCK-8试剂可在加样前用培养基稀释混匀。
3、试剂加入后轻轻振摇培养板，使CCK-8试剂与培养基充分混匀。
4、试剂加入后培养时间根据细胞种类的不同和每孔细胞数量的多少而异。对于贴壁细胞，加入CCK-8的培养时间一般为1~4小时，但在培养30分钟左右即可取出肉眼观察显色程度（根据细胞种类而定）。与贴壁细胞相比，悬浮细胞较难显色。对于悬浮细胞，在加入CCK-8培养1~4小时后，可先从培养箱中取出，目测染色程度或用酶标仪测定决定。白细胞较难显色，因此需要较长的CCK-8反应时间或增加细胞数量（~10⁵个细胞/孔）。若显色困难，可以将培养板放回培养箱，继续培养数小时后再确定。注意：CCK-8的最佳反应时间以具体显色的最佳时间为准。
5、CCK-8试剂中的WST-8会与还原剂反应生成WST-8甲臜，如果实验中有还原剂，需要检查背景的OD值，即在不含细胞的培养基中加入药物，然后加入CCK-8试剂在一定时间内检测，和不加药物的培养基进行比较（只加CCK-8试剂），如果OD值明显偏高，则说明有反应。
6、若细胞培养时间较长导致培养基颜色或pH发生变化，建议更换新鲜培养基后再加入CCK-8试剂。含有酚红的培养基不影响本试剂的使用。
7、如果样品为高浑浊度的细胞悬液，建议设定600nm（或600nm以上）作为参比波长，扣除参比波长的OD值即可。
8、如果要测定细胞的具体数量，需要先做一个标准曲线。
9、若测得OD值过高，可酌减铺板细胞数或CCK-8试剂用量。

试剂包装
500孔：       5ml×1瓶
1000孔：     5ml×2瓶
3000孔：     5ml×6瓶
10000孔：   100ml×1瓶

贮藏条件
CCK-8在避光0~5℃的条件下存放一年，测定效果完全不变。
在-20℃的条件下可以贮存更久。反复冻融会增加背景值，经常使用时请于0~5℃条件下保存。

所需设备和材料

• 10μl、100-200μl以及多通道移液器
• 带有450nm滤光片的酶标仪
• 96孔培养板
• CO₂培养箱