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目录号：IQ580
226.00
目标抗原
Desmoglein 2
主要说明
小鼠抗桥粒芯糖蛋白2 [7H9]
目录编号
IQ580
数量
0.1毫升
浓度
1mg / ml的
克隆
7H9
主办
老鼠
同型
的IgG1
免疫原
人桥粒芯糖蛋白-2的氨基酸37-164与GST融合
骨髓瘤/融合伴侣
NS1骨髓瘤
物种反应性
人的
纯化
蛋白A亲和色谱
格式
纯化的抗体含有PBS + 0.1％叠氮化NA
应用
WB，ICC / IF
稀释液
宜抗体稀释应通过滴定确定，但作为指导起点
WB 1：100 160 kDa波段（特别识别桥粒芯糖蛋白-2的前体区域）
参考
Keim，S。等。人。针对人桥粒芯糖蛋白-2前体的单克隆抗体的产生和表征。杂交瘤卷27号：249-258（2008）PUBMED
数据库链接
Entrez基因：1829人类
Entrez Gene：13511鼠标
Omim：125671人类
SwissProt：Q14126人类
SwissProt：O55111鼠标
Unigene：412597人类
Unigene：345891鼠标
也称为
ARVC 10抗体; ARVC10抗体; ARVD 10抗体; ARVD10抗体; Cadherin家族成员5抗体; CDHF 5抗体; CDHF5抗体; CMD1BB抗体; Desmoglein 2抗体
本产品仅供研究使用。不用于治疗或诊断用途。
细胞间桥粒连接的组成部分。参与斑块蛋白和介导细胞 - 细胞粘附的中间丝的相互作用
免疫荧光方案 - 甲醛固定
1.从Tcunit收集细胞，并用吸力从培养皿中取出培养基。
2.用1x PBS洗涤并取出。
3.在室温下在轨道振荡器上将细胞在预热（37℃）对甲醛中孵育12分钟。
4.去除PFA并在室温下在1x PBS中的0.5％Triton X-100中孵育5分钟。
5.准备封闭试剂，这也是抗体稀释剂。
6.在室温下用1x PBS洗涤细胞2次，在轨道振荡器上洗涤4分钟/洗涤。
7.在室温下用1％NCS和1x PBS封闭30分钟。
8.准备一抗（50 l/盖玻片）和湿润染色室。
9.在室温下用1x PBS洗涤细胞2次并短暂风干。
10.在室温下在黑暗的染色室中与一抗孵育1小时。在此期间准备二抗。
11.用1x PBS洗涤细胞5次（每个烧杯更换5个烧杯/ 5个计数）
12。在室温下在黑暗的染色室中与第二抗体孵育1小时。
13.用1x PBS洗涤细胞5次。
14.登上达皮。
溶液（染色当天新鲜制备）。
* 1x磷酸盐缓冲盐水。
*封闭试剂：1x PBS中1％NCS（使用新鲜的10x PBS）。
*固定液：3.5％对甲醛。
1.75g PFA在20ml d.H2O中加5滴1M NaOH。在50-60℃的热板上搅拌直至溶解。加入4滴IN HCl并检查pH指示条。PH值应为7.4。完成体积，d.H20至25ml，加入25ml 2xPBS。在添加到盖玻片之前检查pH值。
免疫荧光方案 - 甲醇/丙酮固定
1.从TCunit收集细胞，并用吸力从培养皿中取出培养基。
2.用1x PBS洗涤并取出。
3.用冷甲醇：丙酮1：1在冰上固定细胞10分钟。
4.制备阻断试剂，这也是抗体的稀释剂。
5.取出固定剂并在室温下用1x PBS洗涤细胞3次，在轨道振荡器上洗涤4分钟。
6.在室温下用1％NCS和1x PBS封闭30分钟。
7.准备一抗（50？l /盖玻片）和湿染色室。
8.在室温下用1x PBS洗涤细胞2次并风干约7分钟。
9.在室温下在室温下与一抗孵育1小时，在染色室中避光。在此期间准备二抗。
10.用1x PBS洗涤细胞5次（每个烧杯更换5次烧杯/ 5次计数）
11。在室温下，在染色室的黑暗中与第二抗体孵育1小时。
12.用1x PBS洗涤细胞5次。
13.登上达皮。
溶液（染色当天新鲜制备）
* 1x磷酸盐缓冲盐水。
*封闭试剂：1x PBS中1％NCS（使用新鲜的10x PBS）。
*固定液：甲醇：丙酮1：1冰冷。
Western Blotting Protocol
1.将凝胶转移到PDVF或硝酸纤维素膜上
2.将膜置于封闭缓冲液中的塑料托盘中搅拌1小时
3.在洗涤缓冲液中冲洗
4.在洗涤缓冲液和一抗中孵育1小时
5.洗涤6次X用洗涤缓冲液洗涤5分钟
6.在洗涤缓冲液和二抗中孵育1小时
7.用洗涤缓冲液洗涤6X 5分钟
8.检测（例如ECL，Amersham根据制造商的说明）
洗涤缓冲液
PBS + 0.1％Tween 20
阻断缓冲液
洗涤缓冲液+ 5％奶粉
所用抗体的浓度取决于每种抗体，抗原的量和所用的检测方法。通常，稀释在稀释的几百倍稀释到几千倍的范围内，但通常必须凭经验确定。