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mNeonGreen-Trap用于免疫共沉淀反应

pulldownmNeonGreen融合蛋白的优越性能

·对于下游应用无重轻链污染

·强力洗涤条件下,依旧能牢牢结合

·孵化时间短至30min

mNeonGreen-Trap

ChromoTekmNeonGreen-Trap经过验证,对于细胞或组织中提取的mNeonGreen融合蛋白及其相互作用物的快速、有效一步法免疫沉淀,是一种卓越的工具。mNeonGreen-Trap包含了一个羊驼单域抗体偶联至琼脂糖珠或磁性琼脂糖珠。

图1.jpg


Iinput,FT:Flow-through,B:Bound.CoomassiegelandWesternblot.Westernblotindicateshigheffectivenessofpull-down

应用

·免疫沉淀(IP)/免疫共沉淀(Co-IP)

·质谱分析

·酶活性检测

·CHIP/RIP分析

强大而稳定的结合能力

·高亲和力,最低能与解离常数为2nM结合

·能承受的清洗条件:6Murea,2MNaCl,10mMDTT,2%NonidetP40Substitute,1%TritonX-100,0.2%SDS

特性

·mNeonGreen-Trap识别的抗原决定基团与anti-mNeonGreen鼠多抗不同

·高结合能力,每10μl悬浊液中加入12μgmNeonGreen

·便捷——有琼脂糖珠与磁性琼脂糖珠可供选择

技术

骆驼科,比如羊驼,具有一种重链抗体。这些重链抗体缺乏轻链抗体,并通过单结构域(VHH)结合至抗原,这个单结构域也被称为nanobody。这些VHH结构域具有出色的结合特性并能保证批次间的稳定性。

图2.jpg


anti-mNeonGreenIgG抗体

mNeonGreen的免疫荧光(IF),免疫印迹(WesternBlot)以及ELISA实验

敏感性:检测低表达的蛋白

经确认的特异性鼠多抗

anti-mNeonGreenIgGantibody32F6

ChromoTek品牌的anti-mNeonGreenantibody32F6是经过验证的,能在WesternBlot及免疫荧光实验中敏感检测出mNeonGreen融合蛋白的卓越工具。anti-mNeonGreenantibody是一种纯化的mousemonoclonalIgG2a。

特性

与mNeonGreen-Trap的antimNeonGreenVHH识别的抗原不同。

高特异性与亲和力,最低能与解离常数为3.5nM结合

免疫荧光(IF)

图3.jpg


ImmunostainingofHelacellstransientlyexpressingmNeonGreenfusedtoActinChromobody(green)with32F6antibodies(red).MergeimageshowsoverlayofgreenandredchannelsandDAPI(blue).Scalebar,10μm.

WesternBlot(WB)

图4.jpg


WesternblotanalysisofcellextractfromHEK293TcellstransientlyexpressingmNeonGreen-beta-Actin(68.7kDa).

ELISA

图5.jpg


HRPsignalisdetectedasnormalizedabsorptioninpresence(+,strongsignal)andabsence(-,faintsignal)ofanti-mNeonGreenVHH.ResultshowstheapplicabilityofthisantibodypairforELISAmeasurements.



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