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【求助】PlkoTrc单质粒转染293T能表达绿色荧光吗?

急求,小弟原来做过慢病毒,plko,8.91,vsvg三质粒包装,293T细胞,转染没问题,有绿色荧光,用的磷酸钙沉降法。但是最近用磷酸钙法转染PLko单个质粒,也是293T,35mm的dish,50μl的体系,5μg的plko,5μl的cacl2,加dd水至50μl,再加2×HBS 50μl,RT 20min,加入培养液(10%FBS)中,细胞状态好的,融合率也有70% up,6小时换液,>36小时移除培养液,观察细胞,无绿色荧光,各位大仙,求助啊,为什么啊,哪里出问题了?

PS:lipo2000也用了,也没绿色荧光

能具体说说PLko质粒的构成?


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