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Human TopoisomeraseIIα产品描述（Top2a）

我们使用TopoGEN员工开发的专有方法纯化TopoIIα。纯化的酶完全不含拓扑异构酶I污染和核酸酶。它以两个为单位改变独特的拓扑异构体的连接数，并且在SDS-PAGE上检测到的主要多肽为170 kDa；在过载的凝胶上看不到其他条带。

拓扑异构酶II质量控制测试

核酸酶污染：通过测试线性kDNA和线性质粒DNA的形成进行检测。将1 µg链化的KDNA或超螺旋的pUC19 DNA孵育4小时。在37°C下（在 topo II分析条件下，有或没有ATP时）。

通过在抑制topo II活性的条件下测定超螺旋DNA的松弛来评估与topo I的交叉污染。将过量的纯化酶与pRYG DNA在不存在ATP（有和没有Mg ++）的条件下于37°C孵育2小时。在这些条件下，不得检测到pRYG超螺旋DNA的松弛。

当SDS-PAGE凝胶中的纯蛋白质过载时，可以看到一条170 kDa的条带。最终级分中没有180 kDa topo II形式。（蛋白质的浓度因批次而异，但通常在每毫升5-50 ug范围内。）Topo IIa的供应量为2-10单位/ ul（1单位将在30分钟内于37分钟内分解0.2 ug的KDNA。 °C）。topo IIa

的最后部分 来自以下缓冲液中的FPLC色谱柱：10％甘油，50 mM Tris（pH 7.7），1 mM EDTA和EGTA，650 mM NaCl。

拓扑异构酶II检测条件

使用动质体DNA底物在topo II反应缓冲液（50 mM Tris-Cl，pH 8.0，120 mM KCl，10 mM MgCl2。0.5 mM ATP，0.5 mM二硫苏糖醇）中以最终体积20-30μl进行衰变测定。 0.2 µg KDNA。用5 µl（每20 µl反应体积）终止缓冲液（5％的沙克糖基，0.0025％的溴酚蓝，25％的甘油）终止反应。在含有0.5 ug / ml溴化乙锭的1％琼脂糖凝胶上分析反应产物。在凝胶运行时，可以使用手持式紫外线光源轻松监控2.5 kb DNA小圆环末端产物的分辨率。

美国TopoGEN公司成立于1991年，是一家诊断公司，由一批在拓扑异构酶领域工作和在基础、临床、应用及相关方面研究经验丰富的研究者创建，为以药物开发为基础的拓扑异构酶和机制研发人员提供创新产品和服务。药物筛选试剂盒可以分析拓扑异构酶活性药物，用于癌症化疗和抗菌方面。TopoGEN公司还能提供原核和真核化验拓扑异构酶 (I型，II，IV和旋转酶)检测试剂盒，体外体内诊断均可应用。TopoGEN公司还提供DNA载体、DNA裂解目标、拓扑异构酶抑制剂、拓扑异构酶抗体和相关试剂盒等完整产品线。

人类拓扑异构酶IIα单克隆抗体：免疫印迹和免疫组化试剂
制备了针对源自p170 kDa人Topo IIa C端的寡肽的单克隆抗体。然后在含有相同肽的柱子上亲和纯化抗体。亲和纯化的抗体可用于探测Western印迹，前提是包括对照以清楚地标记170 kDa topo II的位置。原因是在常规提取和操作过程中人topo II很容易降解或被蛋白水解。结果，可以检测子带。一些实验室已经报道了SDS-PAGE模式的异质性（Shelton等，1983; Halligan等，1985; Muller等，1988），最近还报道了粟酒裂殖酵母拓扑异构酶II的蛋白水解产物（Shiozaki和Yanagida，1991年）。因此，如果存在广泛的蛋白水解，抗体可能看起来是非特异性的。TG2011-3），其对应于完整的170kDa拓扑异构酶II。报道了编码汉拓扑异构酶II的第二个基因（拓扑II-β或180kDa形式）（Chung等，1989； Tan等，1992）。该抗体与topo II的170 kDa亚型特异性反应。

单克隆抗体单位定义：
抗体浓度以蛋白质印迹单位为单位；一个单位对应于制备常规蛋白质印迹稀释探针所需的抗体的1：1000稀释度。因此，10个单位的抗体将制成10 ml稀释的探针（直接添加到单个印迹中）。

公司旨在为客户提供高质量的实验外包服务（CRO服务），包括实验方案设计，常规基因工程实验操作，重组蛋白表达与纯化，重组抗体制备，天然蛋白分离与纯化，病毒分离培养等免疫学相关技术服务；同时我们也为工业客户提供部分IVD级别抗体和抗原原料。核心平台：---噬菌体抗体展示技术平台苏州蚂蚁淘生物科技有限公司利用自有的噬菌体（M13，T7噬菌体）展示技术平台，能够为客户提供极具性价比的重组Vhh抗体（纳米抗体/驼类纳米抗体）制备方案，包括动物免疫，文库建立，文库筛选以及重组抗体的体外表达等。---抗体工程技术平台卡梅德生物科技的抗体工程平台包含单克隆抗体制备服务平台，多克隆抗体制备服务平台，抗体测序与改造平台。单克隆抗体制备平台：基于杂交瘤技术的小鼠单抗技术平台，最快能够在2-3个月获得高亲和力与高特异性的单克隆抗体，同时基于噬菌体展示技术，我司能够制备多物种的重组单克隆抗体，包括小鼠，兔子，骆驼，羊驼以及人单抗。多克隆抗体制备服务平台：能够为客户提供兔多抗，羊多抗，骆驼类多抗，牛多抗等多物种的抗体制备服务，根据不同的抗原类型，来自蚂蚁淘生物的资深抗体专家会为您量身定做适合您需求的方案，以满足您的项目要求并节省您的宝贵时间。抗体一级序列测序平台：为满足大量客户对抗体基因序列与氨基酸序列信息的需求，我们为客户提供De Novo抗体全长氨基酸序列解析和N端测序服务；同时我们设计积累多达80种杂交瘤抗体基因测序引物。抗体改造技术平台：蚂蚁淘生物技术的抗体改造平台包括嵌合抗体制备，抗体亲和力成熟以及抗体人源化服务。目前我们已经成功制备十几例嵌合抗体与人源化抗体，均成功交付。---蛋白表达与纯化服务技术平台蚂蚁淘生物科技目前拥有四大蛋白表达平台，能为客户提供全面且优质的蛋白表达技术服务。哺乳动物表达平台：目前公司拥有Freestyle CHO，Expi CHO，CHO-DG44，HEK293F，Vero等细胞系用于蛋白表达制备。公司秉承质量优先原则，全部统一采用Gibco细胞培养基和相关转染配套试剂，以保证每个批次的哺乳动物细胞蛋白表达产品高质量、高表达水平的交付。同时公司拥有的表达载体体系，远高于市面常用蛋白表达载体，能够为客户提供高纯度蛋白。昆虫细胞表达平台：目前公司常采用的昆虫表达细胞为SF9，配套使用的是来自Gibco的培养基，只...