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活体成像两种检测技术介绍

活体成像

特点

优点

缺点

生物发光检测

bioluminescence

★荧光素酶(Luciferase)对基因、细胞和活体动物进行标记;

★荧光素酶催化底物(例如荧光素钾盐)反应后,会产生化学发光。这种光是由化学反应而来,不需要激发光;

★标记方法是通过克隆技术,将荧光素酶的基因插入到预期观察的细胞染色体内,通过对克隆细胞进行筛选,培养出能稳定表达荧光素酶的细胞株。再将细胞株转移至特定的小鼠体内形成模型。

★特异性强,无自发荧光;

★高灵敏度,在体内可检测到几百个细胞,检测的深度在3-100px;

★定量精确

 

★信号较弱,检测时间较长;★仪器精密度要求较高;

★细胞或基因需要转基因标记;

★不可用于人体,不适用于抗体多肽等标记

荧光检测

fluorescence

★采用荧光报告基因(GFP、RFP等)或荧光染料进行标记;

★需要外接激发光源,利用报告基因、荧光蛋白质或染料产生的荧光,就可以形成体内的生物光源。

★荧光染料、蛋白标记能力强;

★信号强,成像速度快,操作简便,实验成本较低;

★未来可用于人;

★适用范围广,可以是动物、细胞、微生物,也可以是抗体、药物、纳米材料等。

★存在自发荧光,影响灵敏度;

★光容易被动物组织吸收;

★检测深度受限;

★背景光干扰,定量准确度低


★活体技术荧光检测

荧光蛋白标记

适用于标记细胞、病毒、基因等,通常使用的是GFP、EGFP、RFP(DsRed)等;


荧光染料标记

适用于标记抗体、多肽、小分子药物等;常用的有Cy3、Cy5、Cy5.5及Cy7


量子点标记(新的标记方法)

适用于标记肿瘤,主要应用在活细胞实时动态荧光观察与成像;

量子点(quantumdot)是一种能发射荧光的半导体纳米微晶体,外观恰似一极小的点状物。量子点荧光比有机荧光染料的发射光强的20倍,稳定性强100倍以上,具有荧光发光光谱较窄、量子产率高、不易漂白、激发光谱宽、颜色可调,并且光化学稳定性高,不易分解等诸多优点。



小鼠
1.      首先确定针的入口点。
2.      在膝关节的上部横跨腹部画一条想像的线。
3.      针应该沿着动物右侧这条线并贴近中间插入。(对于雌鼠,针的入口点位于最后一个乳头稍靠中间的部位。)
4.      针从小鼠的右侧插入避开盲肠,盲肠是腹部左侧一个大的充满液体的器官。小肠(位于右侧)不大可能被针刺穿。
5.      针的插入从插入点离尾部或横向太远如上显示将是危险的,可能会注射到后腿里,这样将会造成肌肉组织受伤。
6.      为完成腹腔注射,必须很好地控制好小鼠以防在操作过程中移动。一旦针插入到腹部避免器官受损伤。
7.      控制好小鼠并倾斜以便使其头向下,腹部露出来。
8.      用70%乙醇对注射位点进行彻底消毒。
9.      对于腹部注射我们建议用25-27gauge直径的针,以30度角度插入腹部。
10.  针应插入大约半厘米(4-5mm)的深度。
11.  轻轻地吸出以确认针没有穿透血管,肠或膀胱。
  a.      褐绿色吸出物表示针插进了小肠。
  b.      黄色吸出物暗示针插进了膀胱。
12.  如果任何液体被吸出,表示您的溶液被污染了必须弃掉并用一个新的注射器和针头重新操作。
13.  如果没有液体被吸出,你可以开始注射。
14.  取出针头并记录下注射的时间,以确定信号达峰时间。
大鼠
按照小鼠腹腔注射操作流程。对于大鼠我们建议用一个25gauge直径的针头注射。
注意
l 确保针是倾斜的。
l 使动物的头倾斜向下为了使肠内物向下移动,以保持腹部四分区下部为空腔。
l 为了精确注射深度防止深层注射,我们建议放一根导管在针头上留出4-5mm为合适的深度。
l 确保注射体积,我们建议小鼠不超过2ml,大鼠不超过5ml(请参看附录关于不同动物和位点的不同注射体积。)
l 给大鼠注射时,用布盖在大鼠的头部防止小鼠和研究人员紧张。
静脉注射

为满足集团公司优质客户的广泛生物材料使用需求,公司长期以来提供国际小众品牌的代采购增值服务。经过多年的经验积累和客户反馈,已经建立了成熟完善的国际采购业务平台,美东美西两大合作集货点,自有快速审批和进出口通道。现将此服务开放给广大经销商合作伙伴和全国科研工作者,致力于缩短中国与国际一线研发的差距。

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X:ximbio

Z:Zymesci

特殊类别

细胞:Riken、JCRBCellBankKerafast

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进口流程

(此处以Amsbio为例,实际不同品牌不同产品类型所涉及流程稍有不同)


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苏州蚂蚁淘生物科技有限公司简介

依托于集团公司深厚的资源和超过400家国内优质客户群体,生命科学领域一站式供应链体系,以及高风险生物材料进出口平台的优势,蚂蚁淘生物严格筛选国际创新且经过同行验证过的产品和技术,引入中国市场,开发、孵育和推广。

自公司成立以来,与海外一线品牌建立了长期的交流与合作关系,其中包括多家国际著名细胞和菌种保藏中心。仅2019年内,蚂蚁淘生物接受国内制药企业、科研机构、检测机构和大专院校等单位的委托,从近150个品牌引进各类生物试剂,其中不乏包括细胞株,慢病毒,人体组织切片,血液制品等特种试剂。公司与北京中关村联合创新(绿通北平台)建立了长期的交流与合作关系,可为国内客户提供进口代理业务,完成一站式前置审批、风险评估、检疫审批、清关查验、物流仓储等工作。

本公司特殊物品进口业务,严格遵守国家相关政策和法规流程,致力于为各单位提供更安全、更专业、更便捷的服务。


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