GoldBio/4MethylumbelliferylβDglucopyranoside/M64050/50 g

2020年8月25日Goldbio D-荧光素钾盐 LUCK-1G 荧光素是一种常用的荧光素酶表达的活体成像生物发光报告子。以ATP和Mg2+作为辅因子,有氧条件下荧火虫荧光素酶与水溶性底物反应发...

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荧光素是一种常用的荧光素酶表达的活体成像生物发光报告子。以ATP和Mg2+作为辅因子，有氧条件下荧火虫荧光素酶与水溶性底物反应发出一种特有的黄绿色发射光，在37℃活体内转换为红光。该反应通过消耗ATP来指示是否存在能量或生命的存在。 由于萤火虫荧光素酶的超灵敏性，快速和易于使用的体系，在研究基因表达方面萤火虫荧光素酶是最常用的报告基因之一。荧光素酶被用来监测细菌，培养细胞和转基因植物或动物的启动子活性反应。荧光素酶是一个61kDa大小的蛋白，它的活性形式是单体，且不需要其它的加工修饰。通过催化荧光素的氧化羧化作用，萤火虫荧光素酶会产生已知的生物发光中最高效的反应之一。荧光素酶活性用来描述与启动子/增强子元件相联的基因调控。通过优化，化学发光反应产生的光和调控元件的转录活性之间存在直接相关性。

对于体外报告系统荧光素酶活性的检测，此手册将提供一个简单的，经济可靠的方法。

几个因素将会影响反应的灵敏度，包括温度，pH或底物浓度。为得到zui佳结果，在使用之前我们建议用pH7.8的缓冲液，并且所有试剂在室温下预热。为充分反应，我们建议在分析缓冲液中加入过量的ATP和Mg2+。 当荧光素加入到荧光素酶样品中，会看到瞬间闪光在0.3-0.5秒内达到峰值强度。这光将随着半衰期0.5-1.0分钟左右很快消失。但是初始如果在分析buffer中加入辅酶A，将能阻止快速反应延长半衰期至2-5分钟。如果在反应混合液中后加辅酶A，将促进额外的，次级发光（Fraga, 2008）。

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