为了保证matrigel基质胶的成胶性能与稳定性,稀释浓度不应低于1:3,可用无血清培养基稀释,Matrigel成胶后立即使用。
薄胶成胶方法:
1.冻融后,用预冷的移液枪头混匀Matrigel基质成匀浆状。
2.将需要使用的培养板置于冰上,加入浓度为50μL/cm2生长面积的Matrigel基质。
3.在37℃放置30分钟,即可使用。
厚胶成胶方法:
2.将需要使用的培养板置于冰浴,将培养的细胞与Matrigel基质混合,用移液枪头使其悬浮于基质中。加入浓度为150-200μL/cm2生长面积的Matrigel基质。
3.在37℃放置30分钟,可成胶。可以加入细胞培养的基质,也可使细胞直接生长在胶表面。
薄层包被方法:
2.根据使用需要,采用无血清培养基稀释Matrigel基质。根据实验需要确定最佳包被浓度。
3.将稀释的Matrigel基质包被于所需的培养器皿中,包被量至少覆盖整个器皿的生长表面。室温下孵育1小时。
4.去除未结合的Matrigel,用无血清培养基轻轻地冲洗。
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