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检测脓毒血症标志物 preseptin:分析前混匀方式对结果有影响

Presepsin(可溶性 CD14 亚型),是 CD14 的 N 端片段,一种新的生物标志物,在脓毒症早期诊断、严重程度及预后评估中发挥积极作用。POCT(point-of-care testing),即床边检测。由于操作简单、快速检测的特点,POCT 在全球范围内得到广泛应用,包括生物标志物的检测。技术的迅猛发展允许许多 POCT 设备直接使用 EDTA 抗凝全血检测 preseptin。

韩国 Ji Yeon Ham 等学者发现 CBC 分析之后 preseptin  的 POCT 往往结果偏高。通过开展研究发现,全血标本的分析前混匀可能会对 preseptin 结果产生影响。 文章发表在 Clinical Chemistry and Laboratory Medicine 上。

该研究采集 20 名健康志愿者全血标本,检测标本中 preseptin 和 N 端脑钠肽前体(NT-proBNP)浓度。所有标本分别设平行三管:管 1,轻轻颠倒混匀 10 次;管 2,旋转混匀,50rpm,5 min;管 3,采用 Advia 210  全血细胞分析仪混匀平台。另外匿名采集 22 名脓毒血症患者标本以获得更大范围的 preseptin 值,分别采用第 1 和第 3 种混匀方式。

研究中 Preseptin 和 NT-proBNP 的检测采用非竞争性化学发光法和 Magtration 融合的技术,且厂家推荐避免剧烈混匀如漩涡震荡。为研究时间对混匀效果影响,标本分别在混匀后立即、1 h 以及 5 h 后检测。三组间结果比较采用单因素方差分析,p < 0.05 有统计学差异。结果发现:

1. 就 preseptin 水平而言,管 3 平均值明显高于管 1 和管 2 水平;

2. 同样,脓毒血症患者标本通过 CBC 混匀较颠倒混匀获得更高的 preseptin 值;

3. 颠倒和旋转混匀的标本,preseptin 值不会随时间发生明显改变。CBC 平台混匀的标本,1 h 后的 preseptin 值并未改变,而 5 h 后的水平则明显降低;但是 NT-proBNP 水平不受混匀方式(p = 0.996)和储存时间的影响。

总之,研究中得到的所有标本的 preseptin 值,经 CBC 平台混匀的方式显著高于其他混匀方式。由于 Advia 210  全血细胞分析仪的自动化程序,20 管标本同时加载时,机械混匀总的执行次数 >100 次。提示标本的充分混匀可增加 preseptin 的释放,具体机制不明。最可能的机制是过度混匀可破坏不溶的血细胞成分,导致单核细胞等直接或间接的血细胞活动。

对于全血标本的 preseptin POCT 结果,作者发现了样本混匀同样也是分析前误差的来源。由于每个实验室血细胞分析仪不尽相同,这样便造成了 CBC 分析后的 preseptin POCT 结果可能不精确。


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