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【求助】请问什么染料比EB敏感。

最近做的实验对跑胶的DNA分辨率要求比较高,所以希望找到一种灵敏度比EB高的染料,在这里询问各位高手,谢谢。

目前还没有在灵敏度方面能够替代EB的染料!

除了EB,就数放射性同位素比它灵敏了!其他的还未听说!

呵呵,一楼问题中的分辨率其实跟灵敏度还不太相关。想要灵敏度高,可以作银染染,当然是针对 聚丙烯酰氨凝胶电泳,下面是个人总结的快速银染方法,你可以尝试,至少比EB强10倍,染色液:0.1%AgNO3(可配成20%母液)显色液:10gNaOH,0.2gNa2CO3,2ml甲醛,纯水定容至500ml过程:剥离胶,双蒸水冲洗一次,15s,加染色液,闭光轻摇10min,双蒸水冲洗一次,30s,加少量显色液,轻摇15s,弃去反应液,再加入适量显色液,一般2-3min,可出现清楚条带,未出现条带,可延长时间,切忌勿显色过度。要终止显色,简单的就是倒掉反应液,水洗几次就行。对于变性胶,一般在加入显色液前,用10%乙醇,0.5%HAc固定3min,然后一样操作。当然对于琼脂糖电泳,可以试试国内生物公司的goldview染料,例如博大泰克生物公司的goldview2,平均比EB灵敏度高10倍,很明显,至少不会比EB差,还比较安全,在紫外灯下呈绿色,单链可能呈红色,看惯了EB换换还是挺舒服!


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