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![\"BSA、封闭血清与Fab单链二抗在封闭实验中的应用\"](\"http://www.bio-review.com/wp-content/uploads/2014/12/WB--140x100.jpg\" "\\"BSA、封闭血清与Fab单链二抗在封闭实验中的应用\\"")
免疫学实验中，尝尝会出现高背景值，影响实验结果的检测。这是因为在使用相关免疫学试剂时，蛋白与未吸附的固体载相结合，发生非特异性结合造成的。免疫学实验中常通过封闭试剂来封闭这样的固相载体部位，以减少或消除非特异性结合背景的影响。
常见的封闭剂包括脱脂奶粉、牛血清白蛋白BSA、动物血清和Fab片段单链二抗。因为奶粉中可能存在天然的生物素、碱性磷酸酶，不适合用于磷酸化蛋白检测的封闭以及使用生物素和碱性磷酸酶系统的检测实验。另外，脱脂奶粉中可能含有牛IgG，能够与抗牛、山羊、绵羊、马等二抗有较强的交叉反应，会造成一定的背景。相较于其他封闭剂，脱脂牛奶作为封闭剂的应用范围较窄。艾美捷为您提供全面的免疫学实验封闭剂。
免疫学试验中常通过封闭试剂来封闭未吸附蛋白的固相载体部位，以减少非特异性结合背景的影响。比如ELISA 试验中继包被之后用0.05-0.5% BSA 等溶液来占据未能被包被的空隙；又如WB 试验中常用5% 脱脂奶粉或者BSA 封闭膜上除转印蛋白占据的其它部位。除了用于封闭未吸附蛋白的固相载体，封闭试剂也被广泛用于封闭其它非特异性结合。如ELISA 实验中，特异性抗体与血清样本中IgM、IgG 型类风湿因子以及补体等组分产生非特异性结合；IHC、IF 等试验中，特异性抗体与样本中Fc 受体的结合，以及在IHC 和IF 双染或三染实验中，驴血清也被广泛用于封闭试剂以减少抗体之间的非特异性结合；另外，Fab 片段单链二抗也被用于荧光双染中的有效封闭。
牛血清白蛋白BSA
BSA是最为常见的封闭试剂，与脱脂奶粉相比，BSA组分相对单一，适用于ELISA实验，生物素、碱性磷酸酶系统的免疫学检测实验或者其他对特异性要求较高的实验。值得注意的是，普通级别的BSA中也可能存在牛IgG，因此与能够与抗牛、山羊、绵羊、马等二抗有较强的交叉反应，会造成一定的背景，建议使用不含IgG的BSA产品。