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Cell Technology 的工作理念是将客户的需求放在首位。我们的产品经过最高标准的测试,以确保我们目录中的每个产品都能按规定工作。我们还为最流行的检测提供有竞争力的价格。
我们提供 ADCC/CDC 检测服务,以确定抗体和/或补体针对特定靶细胞系的活性。结果将是治疗性抗体的剂量依赖性动力学反应。检测服务包括优化 E/T 比率,在一系列抗体浓度下测量 ADCC/CDC 活性,在特定 E:T 比率下。可根据要求生成与 FACS 分析的相关数据。

图:  5000 Ramos 细胞/孔与连续稀释的 Rituxan 抗体孵育 15 分钟,然后加入用 IL-2 刺激过夜的纯化 NK 细胞。在指定的 E:T 比率下,将 ADCC 反应进一步温育 2 小时(左图)或 3.5 小时(右图)。使用 aCellaTOX 测定法测量细胞毒性百分比。3.5 小时时间点已优化为 10:1 E:T 比率(绿色)。E:T 比率为 20:1(红色)的图表是平坦的。(100% 细胞毒性)

在加入用 IL-2 维持过夜的纯化 NK 细胞之前,将 5000 Daudi 细胞/孔与连续稀释的 Rituxan 抗体孵育 15 分钟。ADCC 反应在指定的 E:T 比率(25:1 黑色和 10:1 红色)下进一步孵育 2 小时。使用 aCellaTOX 测定法测量细胞毒性百分比。

上图显示了利妥昔单抗的抗体滴度从 0.000977 到 1ug/ml,与 5% 兔宝宝补体和 5000 个 Daudi 靶细胞在 37°C 下孵育 30 分钟

ADCC/CDC实施涉及的步骤

  1. 确定目标细胞系的最佳 E:T 比率。

  2. 采购待测试的抗体(或多个抗体)和靶细胞系。

  3. 使用aCella-TOX 或FACS 分析或两者都可以生成剂量反应曲线。(按照要求)。

客户需提供的材料和资料

  • 目标细胞系(贴壁或悬浮)(冷冻小瓶)和项目所需的足够抗体。
    细胞培养基和目标细胞系生长的条件。

  • 抗体浓度(如果已知)

  • 要测试的 PBMC 供体的数量。

  • 关于目标细胞系抗原表达水平的信息(可应客户要求进行 FACS 分析以确定这一点)。

由细胞技术提供的供应品

  • 所有额外的供应品将由 Cell Technology 采购并按成本向客户收费。

  • 最终报告将在项目结束后上交,并带有剂量反应曲线,显示抗体依赖性。


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celltechnology 5x 通用板涂布缓冲液货号:ECB100类别:5x 包被缓冲液, ELISA 产品改进检测节省宝贵的试剂。通过促进更高的特异性信号,在使用该缓冲液时可能需要更少的蛋白质来包被板并且可能需要更少的检测分子来产生信号。延长盘子的保质期。根据包被蛋白的活性,板可以在室温或 2°-8°C 下在适当条件下储存数月甚至数年。提高再现性。通过使用来自可靠来源的一致试剂,您的 ELISA 可能会变得更具重现性。增加 ELISA 的信号。如果抗体或抗原没有粘附在板上,或者不需要的蛋白质干扰结合,则板的整体特异性信号将很低。CB1 可以促进吸附并减少干扰。降低背景噪音。如果过量的蛋白质粘在板上,则板将具有整体高背景(整体信号高,但特定信号低)。Universal Plate Coating Buffer 可以减少干扰。路线只需按 1:5 稀释包被缓冲液(例如,将 100 毫升包被缓冲液添加到 400 毫升 diH20 中,最终体积为 500 毫升),添加您的蛋白质抗原或抗体,让溶液搅拌 15 分钟,然后移液到板上。这个怎么运作?我们的包被缓冲液是缓冲液和盐的最佳配方,可最大限度地将抗体和抗原吸附到聚苯乙烯板上。在吸附过程中,包被缓冲液通过保持其三级三维结构来稳定包被蛋白质。通过稳定吸附的蛋白质,保留抗原区域,允许与检测分子的更大结合反应性,从而增强特异性信号。通过产生更高的特异性信号,使用该缓冲液时可能需要更低浓度的外壳蛋白,从而节省宝贵的试剂。


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