CIK细胞培养程序
1. 将分离机采集细胞缓慢加在细胞分离液(1.077 g/ml)上,体积比为1:1,800?g,室温离心20分钟;
2. 收集界面的白色絮状细胞加入30ml的低糖DMEM培养基,轻轻吹打混匀,300?g,室温离心10分钟;
3. 重复离心洗涤共3遍;
4. 收取细胞轻轻吹打混匀,加入无血清培养基及IFN-γ500 U/ml置37℃、5% CO2孵箱中培养;
5. 24 h后加入IL-2 300 U/ml,CD3 10 ng/ml,IL-1 100 U/ml 继续培养,;
6. 每天观察细胞生长状态并根据情况进行换液及加入IL-2 300 U/ml进行扩增;
7. 细胞收集:第14-20天收集细胞,离心弃上清液,用生理盐水洗涤细胞2 次以上,重新混匀,悬于100~200 ml 输注用生理盐水中。
附件30-32
治疗方案制定
从理论上来说,几乎每一位肿瘤病人都可以从免疫治疗中获得益处。早期肿瘤病人由于机体免疫系统尚未受到肿瘤的严重影响,对免疫治疗的应答较好,疗效相对也会更好。CIK 细胞对多种实体肿瘤均有明显疗效,对白血病也有很好作用,尤其是骨髓移植或化疗缓解后能够清除残存的肿瘤细胞,防止复发。CIK 细胞治疗肿瘤的疗效除与输注细胞数量及活性有明显关系外,还与患者的选择有很大关系。
适应证
CIK 细胞可用于下述肿瘤患者的辅助治疗:
1)手术后患者,可防止肿瘤转移、复发;
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