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公司代理生物计划 scarabgenomics授权

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我们部分客户

1:经销商代表---国药化试,飞世尔,SIGMA,等1000家左右的经销商

2:学校代表---北京大学,清华大学,上海交通大学,复旦大学,浙江大学,武汉大学,厦门大学.....等200所左右大学及100多家附属医院

3:制药公司代表:罗氏,阿斯利康,诺和诺德,和记黄埔,东阳光科......

4:CRO公司代表:睿智化学,药明康德,桑迪亚,美迪西......

我们现有代理品牌如下,还在不断增加中



scarabgenomics由于解决了低抗原性的最初问题,质粒DNA疫苗(pDNA)受到了新的关注。这些疫苗因其快速的开发周期,温度稳定性和通过大肠杆菌发酵的廉价生产而特别有吸引力然而,传统的菌株大肠杆菌包含移动的DNA元件,包括高达65个插入序列(IS)和至多在其基因组中有11种部分地有缺陷的噬菌体的图1噬菌体和IS元素均可在生产过程中被激活,导致发酵结果不一致。而且,IS元件可以转座到质粒产物中图2,改变治疗剂的顺序和功能;导致细菌IS元素可能在给药后进入哺乳动物基因组。幸运的是,可以通过在pDNA生产的所有步骤中使用大肠杆菌的多个缺失菌株(MDS)消除所有这些问题这些菌株经过精确设计,可以去除所有噬菌体和转座序列


scarabgenomics重组蛋白生产是生命科学中使用的最强大的技术之一。产生和纯化大量靶重组蛋白的能力使多种可能性成为可能,包括其用于诊断或疾病治疗或在工业过程中的用途。

乍一看,重组蛋白的表达看起来直截了当。encoding将编码所需蛋白的DNA克隆到表达载体中启动子的下游。将该克隆导入宿主细胞,细胞的蛋白质合成机制产生所需的蛋白质。但是,实际上,蛋白质表达可能会非常具有挑战性,因为可能有很多因素影响该过程。例如,某些蛋白质可能具有蛋白酶活性,这也可以通过选择表达宿主来解决。一些蛋白质可能具有有害于宿主的活性。

ScarabXpress-1和ScarabExpress-2Δ之间有什么区别
ScarabXpress1由ScarabXpress®T7 lac组成宿主+含有T7启动子的载体,例如pET载体。ScarabXpress2由Scarab的pSX2表达载体 + ANY CleanGenome® 大肠杆菌宿主菌株组成。


scarabgenomics在pDNA生产中遇到的一个常见挑战是茎环DNA结构的存在,例如病毒长末端重复序列(LTR)或短发夹RNA(shRNA),它们难以复制并且即使在特意设计的E中也使载体不稳定大肠杆菌宿主,例如Stbl3™。清洁Genome® 大肠杆菌可显着提高不稳定pDNA载体的产量。

CleanGenome®E . coli Out表现出用于慢病毒生产的Stbl3™。Chakiath&Esposito(2007)研究表明,“包含慢重复序列的慢病毒表达克隆通常在大肠杆菌中表现出极大的不稳定性。。” 即使是专门设计用于克隆慢病毒直接重复序列的宿主(例如Stbl3™)也被证明是不足够的。Chakiath&Esposito表明,CleanGenome® 大肠杆菌菌株MDS™42是基因组平台减少的基础菌株,可稳定包含这些重复序列的慢病毒表达克隆(图1)。在使用MDS™42进行的100多次克隆反应中,这些作者仅选择了两个转化子菌落进行分析,在超过95%的情况下,两个克隆都具有正确的限制性图谱,从而节省了重组质粒制备的大量时间和精力。

同样,衍生自腺相关病毒(AAV)的载体带有两个反向重复序列,形成40 bp茎。在末端,另外两个9bp的茎分支进一步终止于环结构。这两个茎环本身包含直接重复序列,当在标准大肠杆菌宿主中生长时,特别容易被删除极端的例子是pT-ITR-IL2载体(图2),其中包含ITR1和ITR2茎环,它们也是彼此直接重复的。

为了测试CleanGenome®菌株解决不稳定的生物治疗性pDNA生产挑战的能力,圣甲虫基因组公司使用了腺相关病毒pT-ITR-IL2载体。将其转化到MDS™42和未还原的亲本菌株大肠杆菌中K-12 MG1655。选择含有对NotI,KpnI和MscI具有正确限制模式的质粒的克隆。

为了测试在大肠杆菌中的生长过程中的稳定性,将来自两个宿主的一式三份的克隆在Luria Broth中在37°C下生长24小时,并进行选择。取出培养样品进行分析,然后将每组的一种正确培养物通过在新鲜肉汤中稀释10-6 – 10-7来开始连续传代。再进行四次相似的连续传代,从每个阶段分离质粒DNA以进行分析。

在MDS™42中生长的pT-ITR-IL2的限制性酶切消化模式没有随传代而改变,而MG1655生长的质粒不稳定(图3)。)。KpnI消化物(单个位点)显示出较小的质粒片段,与通过内部重组使质粒重复序列之间的“锤头”区域丢失相一致。MscI消化(每个ITR两侧的位点)同样显示出片段之一的逐渐丢失,与KpnI消化一致。DNA测序证实了这些结果。


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