{英文名称}FCGRT抗体鼠兔来源
{中文名称}FCGRT抗体鼠兔来源
{规格}:0.1ml0.2ml
{研究领域}肿瘤细胞生物神经生物学信号转导新陈代谢
{抗体来源}RabbitMourseRat,
{克隆类型}Polyclonalmonoclonal
{交叉反应}Human,Mouse,Rat,Pig,Horse,
{产品应用}WB=1:100-500ELISA=1:500-1000IP=1:20-100IHC-P=1:100-500IHC-F=1:100-500ICC=1:100-500IF=1:100-500(石蜡切片需做抗原修复)
notyettestedinotherapplications.
optimaldilutions/concentrationsshouldbedeterminedbytheenduser.
{分子量}50kDa
{性状}LyophilizedorLiquid
{浓度}1mg/1ml
{亚型}IgG
{纯化方法}affinitypurifiedbyProteinA
{储存液}Preservative:15mMSodiumAzide,Constituents:1%BSA,0.01MPBS,pH7.4
{保存条件}Storeat-20°Cforoneyear.Avoidrepeatedfreeze/thawcycles.Thelyophilizedantibodyisstableatroomtemperatureforatleastonemonthandforgreaterthanayearwhenkeptat-20°C.WhenreconstitutedinsterilepH7.40.01MPBSordiluentofantibodytheantibodyisstableforatleasttwoweeksat2-4°C.
PubMedPubMed
公司代理的抗体品牌:ACD、BDPharmingenCST、Labvision/NeoMarker、Merck、Miltenyi、RD、Santacruz、Sigma-Aldrich、AbD、SEROtec、Abnova、Acris、Alomone、Alpco、Anaspec、Bachem、Bioss、BioVision、BPS、CarnABIo、CiSBIo、Cytoskeleton、Fitzgerald、Hytest、ICLLab、Innovative、Research、Lifespan、Medix、MBL、Neuromics、PeproTech、Progen、Prospec、QED、Stemgent、Tocris、Usbio
免疫荧光技术FCGRT抗体鼠兔来源的实验步骤
1.直接免疫荧光法测抗原
⑴基本原理
将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应。其优点是方法简便、特异性高,非特异性荧光染色少。缺点是敏感性偏低;而且每检查一种抗原就需要制备一种荧光抗体。此法常用于细菌、病毒等微生物的快速检查和肾炎活检、皮肤活检的免疫病理检查。
⑵试剂与仪器
磷酸盐缓冲盐水(PBS):0.01mol/L,pH7.4
荧光标记的抗体溶液:以0.01mol/L,pH7.4的PBS进行稀释
缓冲甘油:分析纯无荧光的甘油9份+pH9.20.2M碳酸盐缓冲液1份配制
搪瓷桶三只(内有0.01mol/L,pH7.4的PBS1500ml)
有盖搪瓷盒一只(内铺一层浸湿的纱布垫)
荧光显微镜
玻片架
滤纸
37℃温箱等。
⑶实验步骤
①滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,10min后弃去,使标本保持一定湿度。
②滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其完全覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间(参考:30min)。
③取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5min,不时振荡。
④取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
⑤立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度,一般可用“+”表示:
(-)无荧光;()极弱的可疑荧光;(+)荧光较弱,但清楚可见;(++)荧光明亮;(+++--++++)荧光闪亮。待检标本特异性荧光染色强度达“++”以上,而各种对照显示为()或(-),即可判定为阳性。
⑷注意事项
1)对荧光标记的抗体的稀释,要保证抗体的蛋白有一定的浓度,一般稀释度不应超过1:20,抗体浓度过低,会导致产生的荧光过弱,影响结果的观察。
2)染色的温度和时间需要根据各种不同的标本及抗原而变化,染色时间可以从10min到数小时,一般30min已足够。染色温度多采用室温(25℃左右),高于37℃可加强染色效果,但对不耐热的抗原(如流行性乙型脑炎病毒)可采用0-2℃的低温,延长染色时间。低温染色较37℃30min效果好的多。
3)为了保证荧光染色的正确性,首次试验时需设置下述对照,以排除某些非特异性荧光染色的干扰。
①标本自发荧光对照:标本加1-2滴0.01mol/L,pH7.4的PBS。
②特异性对照(抑制试验):标本加未标记的特异性抗体,再加荧光标记的特异性抗体。
③阳性对照:已知的阳性标本加荧光标记的特异性抗体。
如果标本自发荧光对照和特异性对照呈无荧光或弱荧光,阳性对照和待检标本呈强荧光,则为特异性阳性染色。
4)一般标本在高压汞灯下照射超过3min,就有荧光减弱现象,经荧光染色的标本在当天观察,随着时间的延长,荧光强度会逐渐下降。
免疫组化问题解答:
1染色过强
原因解决方法
a抗体浓度过高或孵育时间过长降低抗体滴度、抗体孵育时间:室温1小时或4度隔夜
b孵育温度过高超过37度一般在室温20-28度
cDAB显色时间过长或浓度过高显色时间不超过5-12分钟,以显微镜下观察为准
2非特异性背景染色
原因解决方法
a操作过程中冲洗不充分每步冲洗3次每次5分钟
b组织中含过氧化物酶未阻断可再配置新鲜3%H2O2封闭孵育时间延长
c组织中含内原性生物素正常非免疫动物血清再封闭
d血清蛋白封闭不充分延长血清蛋白封闭时间
各类FCGRT抗体鼠兔来源主要功能有:
(1)IgG:血清中含量zui高,因此是zui重要的抗感染分子,包括抗菌、抗病毒、抗毒素等。IgG还能激活补体,结合并增强巨噬细胞的吞噬功能(调理作用和ADCC效应),穿过胎盘,保护胎儿及新生婴儿免受感染。
(2)IgA:分单体和双体两种。前者存在血清中,后者存在于黏膜表面及分泌液中,是黏膜局部抗感染的重要因素。
(3)IgM:是分子量zui大,体内受感染后zui早产生的抗体,具有很强的激活补体和调理作用,因此是重要的抗感染因子,且常用于诊断早期感染。
(4)IgD:主要存在于成熟B细胞表面,是B细胞识别抗原的受体。
(5)IgE:血清中含量zui少的抗体,某些过敏性体质的人血清中可检测到,参与介导I型超敏反应和抗寄生虫感染。
Anti-IL-1RA抗体(IHC,WB)白介素-1受体拮抗剂抗体
Anti-GST-Tag抗体(IHC,WB)谷胱甘肽S转移酶标签蛋白抗体
Anti-Shiga-liketoxinIIevariantsubunitA抗体(IHC,WB)抗大肠杆菌志贺样毒素Ⅱ型突变体(O139菌型)抗体
Anti-FLAGTag(CT)?抗体(IHC,WB)FLAGTag标签抗体(C端)
Anti-CD144/VE-cadherin/VECD抗体(IHC,WB)VE-cadherin?上皮型钙粘附分子/血管内皮钙粘蛋白抗体
Anti-β-Amyloid1-40/Aβ1-40抗体(IHC,WB)β淀粉样肽β-Amyloid1-40/Aβ1-40C端抗体
Anti-β-Amyloid1-40(CT)mouse抗体(IHC,WB)β淀粉样肽1-40C端抗体
Anti-phospho-PKB(pSer473)抗体(IHC,WB)抗磷酸化蛋白激酶B抗体(丝氨酸磷酸化位点:473)
Anti-PKN2抗体(IHC,WB)蛋白激酶N2抗体
Anti-DEKoncogene抗体(IHC,WB)?DEK癌基因结合蛋白
Anti-SPY抗体(IHC,WB)抗spindly抗体
Anti-β-Amyloid抗体(IHC,WB)β淀粉样肽(25-35)抗体
Anti-β-Amyloid抗体(IHC,WB)β淀粉样肽(31-35)抗体
Anti-HHV8/ORFK2抗体(IHC,WB)人类疱疹病毒8抗体
Anti-BKCachannels抗体(IHC,WB)钙激活钾通道蛋白抗体
Anti-ZEBRA/HHV4/EBV抗体(IHC,WB)人类疱疹病毒4抗体
Anti-GROα/GRO-1/MGSA/CXCL1protein抗体(IHC,WB)生长调节致癌基因α/生长调节致癌基因-1抗体
Anti-2|4-D抗体(IHC,WB)2|4-二氯苯氧乙酸/除草剂/激素型除草剂抗体
Anti-HHV8/ORF50抗体(IHC,WB)人类疱疹病毒8抗体
Anti-β-arrestin1抗体(IHC,WB)β-抑制蛋白1抗体
Anti-SLC34A2/NaPi-2b抗体(IHC,WB)磷酸钠协同转运蛋白抗体
Anti-VAP1抗体(IHC,WB)血管粘附蛋白1抗体
Anti-EV71抗体(IHC,WB)VP1?肠道病毒71型/手足口病病毒抗体
Anti-S-100A1抗体(IHC,WB)钙结合蛋白S100A1抗体
Anti-Apo-a1/ApoA1抗体(IHC,WB)载脂蛋白A1抗体人白三烯D4(LTD4)ELISA试剂盒HumanleukotrieneD4,LT-D4ELISA试剂盒
人网膜素(omentin)ELISA试剂盒HumanomentinElisa试剂盒
人晚期糖基化终末产物(AGEs)ELISA试剂盒Humanadvancedglycationendproducts,AGEsElisa试剂盒
人分泌型免疫球蛋白A(SIgA)ELISA试剂盒HumansecretoryimmunoglobulinA,SIgAElisa试剂盒
人胰抑制素(Pancreastatin)ELISA试剂盒HumanPancreastatinElisa试剂盒
人胰激肽原酶(PK)ELISA试剂盒Humanpancreatickininogenase,PKElisa试剂盒
人胰高血糖素(GC)ELISA试剂盒HumanGlucagon,GCElisa试剂盒
人胰多肽(PP)ELISA试剂盒HumanPancreaticPolypeptide,PPElisa试剂盒
人胰岛素自身抗体(IAA)ELISA试剂盒Humaninsulinautoantibodies,IAAElisa试剂盒
人胸腺五肽(TP-5)ELISA试剂盒HumanThymopentin,TP-5Elisa试剂盒
人胸腺肽(Thymosin)ELISA试剂盒HumanThymosinElisa试剂盒
人胸腺表达趋化因子(TECK/CCL25)ELISA试剂盒Humanthymusexpressedchemokine,TECKElisa试剂盒
人胃抑素(GIP)ELISA试剂盒Humangastricinhibitorypolypeptide,GIPElisa试剂盒
人促胰液素/分泌素受体(SR)ELISA试剂盒Humansecretinreceptor,SRElisa试剂盒
人促胰液素/胰泌素(Secretin)ELISA试剂盒HumanSecretinElisa试剂盒
人内脂素/内脏脂肪素(visfatin)ELISA试剂盒HumanvisfatinElisa试剂盒
人C型钠尿肽(CNP)ELISA试剂盒HumanC-typenatriureticpeptide,CNPElisa试剂盒
人丙酮酸脱氢酶E1(PDHE1)ELISA试剂盒Humanpyruvatedehydrogenase-E1,PDHE1Elisa试剂盒
人血清总补体(CH50)ELISA试剂盒Human50%complementhemolysis,CH50Elisa试剂盒
人白三烯C4(LTC4)ELISA试剂盒HumanLeukotrieneC4,LT-C4Elisa试剂盒
人二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA试剂盒HumandipeptidylpeptldaseⅣ,DPPⅣElisa试剂盒
人组胺(HIS)ELISA试剂盒humanHistamine,HISElisa试剂盒
人游离雌三醇(FE3)ELISA试剂盒humanfreeEstriol,FE3Elisa试剂盒
FCGRT抗体鼠兔来源产品免疫组化反应:
免疫组化实验原理:
抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性,免疫组织化学正是利用了这一原理。先将组织或细胞中的某种化学物质提取出来,以此作为抗原或半抗原,通过免疫动物后获得特异性的抗体,再以此抗体去探测组织或细胞中的同类的抗原物质。由于抗原与抗体的复合物是无色的,因此还必须借助于组织化学的方法将抗原抗体结合的部位显示出来,以其达到对组织或细胞中的未知抗原进行定性,定位或定量的研究。
免疫组织化学技术按照标记物的种类:
免疫荧光法、免疫酶法、免疫铁蛋白法、免疫金法及放射免疫自显影法等。
这些常用免疫组织化学方法的原理:
1.免疫荧光细胞化学技术:将已知抗体标上荧光素,以此作为探针检查细胞或组织内的相应抗原,在荧光显微镜下观察.当抗原抗体复合物中的荧光素受激发光的照射后会发出一定波长的荧光,从而可以确定组织中的抗原定位或定量。
2.免疫酶细胞化学技术:是目前免疫组织化学研究中zui常用的技术.基本原理是先以酶标记的抗体与组织或细胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒,通过光镜或电镜,对细胞或组织内的相应抗原进行定位或定性研究。
3.免疫胶体金技术:就是用胶体金标记一抗,二抗或其他的能特异性的结合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌A蛋白)等作为探针对组织或细胞内的抗原进行定性,定位或定量研究.由于胶体金的电子密度高,多用于免疫电镜的单标记或多标记的定位研究。
产品WB实验中的对照系统:
Westernblotting实验原理:免疫印迹(immunoblotting)又称蛋白质印迹(Westernblotting),它是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。该法是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术。由于免疫印迹具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫测定的高特异性和敏感性,现已成为蛋白分析的一种常规技术。免疫印迹常用于鉴定某种蛋白,并能对蛋白进行定性和半定量分析。WB对照系统:阳性对照:有标准品,或阳性血清、阳性上清。阴性对照:测血时用相应小鼠未免疫血清,测培养上清,用无克隆培养上清。空白对照:不加一抗,用1%BSA代替。无关对照(替代对照):用无关项目一抗,或无关项目的抗体。