Life细胞凋亡产品（2）

2.1 膜电位——可固定探针 MitoTracker?染料为依赖细胞膜电位的探针，可针对红细胞中的线粒体进行染色。与膜去极化的线粒体相比，MitoTracker?染料在正常运作的线粒体中会产生较强的荧光信号，因此可用于辨识细胞群体中的健康细胞。即便经过后续的免疫细胞化学、DNA末端标记、原位杂交或复染后，MitoTracker?的染色结果仍能保持不变。MitoTracker? Red CMXRos(图4)与绿色荧光染料共用时，呈现极低的光谱重叠，而MitoTracker? Orange CMTMRos则能与远红荧光染料共用。MitoTracker? Red CM-H2Xros及MitoTracker? Orange CM-H2TMRos为需极低荧光背景的实验的最佳选择。
	图4. 以MitoTracker? Red CMXRos分析线粒体膜电位。取自牛肺动脉的内皮活细胞同时以50 nM LysoTracker? Blue-White DPX、Dapoxyl?衍生物及100 nM MitoTracker? Red CMXRos进行染色。
2.2 膜电位——不可固定探针该类染料能针对细胞凋亡时的线粒体膜电位丧失提供快速、简单且可靠的检测。 1.JC-1为阳离子染料，在线粒体中会依据电位而累积，放射出的荧光会因此由绿色(~525 nm)位移至红色(~590 nm)，可有效应用于比例测量(图5和6) 2.MitoProbe? DilC1(5)及MitoProbe? DiOC2(3) Assay Kit包含carbocyanine染料，可用于测定线粒体膜电位。前者可由红光激发，后者可由蓝光激发。 3.Rhodamine 123及dihydrorhodamine 123可轻易地经运行中的线粒体隔离，而不会导致细胞毒性。这类Rhodamine染料能快速吸收并达到平衡——仅需数分钟的时间，相比之下，其他膜电位敏感染料则需30分钟以上。 4.Tetramethylrhodamine的甲基酯及乙基酯(分别为TMRM及TMRE)可有效用于包含绿色荧光染料的多重颜色应用方法。
	图5. 以JC-1分析线粒体膜电位。NIH/3T3小鼠纤维母细胞以JC-1染色，再用过氧化氢处理。以渐进式图像显示相同图像视野下的细胞在H2O2处理前后的情形，红色的聚合荧光减少，而绿色单体荧光则在细胞质中扩散。

图6. 以MitoProbe? JC-1 Assay Kit (M34152)针对Jurkat细胞进行流式分析。Jurkat细胞以2 μM JC-1于37℃、5% CO2之下染色15分钟，再以PBS冲洗，在流式细胞仪中分析。(A)未处理的细胞。(B)在37℃下用10 μM 喜树碱处理4小时以诱导凋亡细胞。
2.3 线粒体通透孔线粒体通透孔是由线粒体内外膜成分所构成的非特异性通道，参与了细胞凋亡及坏死时线粒体内成分的释放。MitoProbe? Transition Pore Assay Kit相比于仅依赖线粒体膜电位的实验方法而言，对于线粒体通透性通透孔的开启提供了更直接的测量方法。产品列表

货号	产品名称	应用	细胞类型	是否可固定	Ex/Em	规格
M7514	MitoTracker? Green	FMFCM;IF	活细胞	否	490/526	20×50μg
M7510	MitoTracker? Orange CMTMRos	FCM;IF	活细胞	是	554/576	20×50μg
M7511	MitoTracker? Orange CM-H2TMRos	FCM;IF	活细胞	是	554/576	20×50μg
M7512	MitoTracker? Red CMXRos	FCM;IF	活细胞	是	579/599	20×50μg
M7513	MitoTracker? Red CM-H2Xros	FCM;IF	活细胞	是	579/599	20×50μg
T3168	JC-1	FCM;IF	活细胞	否	514/529	5mg
M34150	MitoProbe? DiOC2(3) Assay Kit	FCM	活细胞	否	482/497	1 kit
M34151	MitoProbe? DiIC1(5) Assay Kit	FCM	活细胞	否	638/658	1 kit
M34152	MitoProbe? JC-1 Assay Kit	FCM	活细胞	否	514/529	1 kit
T668	Tetramethylrhodamine, Methyl Ester, Perchlorate (TMRM)	FCM;IF	活细胞	否	549/573	25 mg
T669	Tetramethylrhodamine, Ethyl Ester, Perchlorate (TMRE)	FCM;IF	活细胞	否	549/574	25 mg
D23806	Dihydrorhodamine 123	FCM;IF	活细胞	否	507/529	1 ml
M34153	MitoProbe? Transition Pore Assay Kit	FCM	活细胞	否	494/517	1 kit

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