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Life细胞凋亡产品(2)


2.1膜电位——可固定探针  MitoTracker?染料为依赖细胞膜电位的探针,可针对红细胞中的线粒体进行染色。与膜去极化的线粒体相比,MitoTracker?染料在正常运作的线粒体中会产生较强的荧光信号,因此可用于辨识细胞群体中的健康细胞。即便经过后续的免疫细胞化学、DNA末端标记、原位杂交或复染后,MitoTracker?的染色结果仍能保持不变。MitoTracker?RedCMXRos(图4)与绿色荧光染料共用时,呈现极低的光谱重叠,而MitoTracker?OrangeCMTMRos则能与远红荧光染料共用。MitoTracker?RedCM-H2Xros及MitoTracker?OrangeCM-H2TMRos为需极低荧光背景的实验的最佳选择。
图4.以MitoTracker?RedCMXRos分析线粒体膜电位。取自牛肺动脉的内皮活细胞同时以50nMLysoTracker?Blue-WhiteDPX、Dapoxyl?衍生物及100nMMitoTracker?RedCMXRos进行染色。
2.2膜电位——不可固定探针  该类染料能针对细胞凋亡时的线粒体膜电位丧失提供快速、简单且可靠的检测。  1.JC-1为阳离子染料,在线粒体中会依据电位而累积,放射出的荧光会因此由绿色(~525nm)位移至红色(~590nm),可有效应用于比例测量(图5和6)  2.MitoProbe?DilC1(5)及MitoProbe?DiOC2(3)AssayKit包含carbocyanine染料,可用于测定线粒体膜电位。前者可由红光激发,后者可由蓝光激发。  3.Rhodamine123及dihydrorhodamine123可轻易地经运行中的线粒体隔离,而不会导致细胞毒性。这类Rhodamine染料能快速吸收并达到平衡——仅需数分钟的时间,相比之下,其他膜电位敏感染料则需30分钟以上。  4.Tetramethylrhodamine的甲基酯及乙基酯(分别为TMRM及TMRE)可有效用于包含绿色荧光染料的多重颜色应用方法。
图5.以JC-1分析线粒体膜电位。NIH/3T3小鼠纤维母细胞以JC-1染色,再用过氧化氢处理。以渐进式图像显示相同图像视野下的细胞在H2O2处理前后的情形,红色的聚合荧光减少,而绿色单体荧光则在细胞质中扩散。
图6.以MitoProbe?JC-1AssayKit(M34152)针对Jurkat细胞进行流式分析。Jurkat细胞以2μMJC-1于37℃、5%CO2之下染色15分钟,再以PBS冲洗,在流式细胞仪中分析。(A)未处理的细胞。(B)在37℃下用10μM喜树碱处理4小时以诱导凋亡细胞。

2.3线粒体通透孔  线粒体通透孔是由线粒体内外膜成分所构成的非特异性通道,参与了细胞凋亡及坏死时线粒体内成分的释放。MitoProbe?TransitionPoreAssayKit相比于仅依赖线粒体膜电位的实验方法而言,对于线粒体通透性通透孔的开启提供了更直接的测量方法。

产品列表

货号产品名称应用细胞类型是否可固定Ex/Em规格
M7514MitoTracker?GreenFMFCM;IF活细胞490/52620×50μg
M7510MitoTracker?OrangeCMTMRosFCM;IF活细胞554/57620×50μg
M7511MitoTracker?OrangeCM-H2TMRosFCM;IF活细胞554/57620×50μg
M7512MitoTracker?RedCMXRosFCM;IF活细胞579/59920×50μg
M7513MitoTracker?RedCM-H2XrosFCM;IF活细胞579/59920×50μg
T3168JC-1FCM;IF活细胞514/5295mg
M34150MitoProbe?DiOC2(3)AssayKitFCM活细胞482/4971kit
M34151MitoProbe?DiIC1(5)AssayKitFCM活细胞638/6581kit
M34152MitoProbe?JC-1AssayKitFCM活细胞514/5291kit
T668Tetramethylrhodamine,MethylEster,Perchlorate(TMRM)FCM;IF活细胞549/57325mg
T669Tetramethylrhodamine,EthylEster,Perchlorate(TMRE)FCM;IF活细胞549/57425mg
D23806Dihydrorhodamine123FCM;IF活细胞507/5291ml
M34153MitoProbe?TransitionPoreAssayKitFCM活细胞494/5171kit
     

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