融合瘤技术大突破，制备单株抗体更容易！

单株抗体的重要性

在传统蛋白质研究中，单株抗体需求度大，因为在特定研究中，需要透过抗体辨认特定抗原，确认特定抗原的存在与否或估算其表现量。在临床上检测，利用单株抗体也可做为筛检工具，作为病原菌或疾病检测的工具。此外，现在最热门的单株抗体应用模式，则是作为自体免疫疾病用药与癌症标靶治疗。2016年全球前十大热销药物当中，便有5种药物属于单株抗体药物，显示单株抗体不在只是传统生物学研究的手段，更是人类疾病治疗的重大契机。

单株抗体生产不易

单株抗体生产技术自1975年问世以来，最难处在于生产单株抗体的融合瘤细胞不易取得，且制造流程繁杂，使单株抗体生产不易的问题，持续困扰世界各地的科学家们。纵使有创新与独到的开发目标，若无法顺利且快速取得能生产单株抗体的融合瘤细胞与关键的单株抗体，往往拖延实验进程，更可能错失学术发表或是拥有自家专利的机会。

经实验得知，平均1000个融合瘤细胞可以得到1个产生针对抗原抗体细胞，而在1000个产生针对抗原抗体细胞内只有1个会理想状态的融合瘤细胞，所以大约108的细胞可以得到一个完美的融合瘤细胞。导致单株抗体不易制造的主因是细胞融合后细胞存活率低，如图.1所示，使用一般牛血清培养液进行培养融合细胞，平均一盘96孔盘只有110～130个NS/1融合细胞存活，而SP-2融合细胞存活更低；一般实验室为了增加细胞存活率会使用Feederlayer进行培养细胞，但是使用Feederlayer提升效果有限，平均一盘96孔盘可以提高至150～230个NS/1融合细胞存活，距离得到一个适合融合瘤细胞还是非常遥远。

图1.一般培养和FeederLayer培养后融合细胞存活率

HybriMoreHybridomaCloningFactor技术突破

单株抗体的置备过程中，将脾细胞和骨髓瘤细胞进行融合在一个细胞内，此杂交瘤细胞需要进行DNA重组且必须修复融合时对细胞的伤害才能顺利生长。但在单株化过程中，杂交瘤细胞很容易死亡，导致原本已产生抗体的细胞株因单株化失败而消失。为了帮助杂交瘤细胞度过危险期，一般实验室会提供一些生长因子或是IL-6帮助杂合瘤细胞生长，然而配置培养液需添加太多其他不同的生长因子，细胞成功率的提升效果有限，且可能会降低细胞分泌抗体的能力。台湾品牌VisualProtein透过反覆验证，开发纯化学配方的HybriMoreHybridomaCloningFactor，能大幅提升细胞存活率，并且不会影响抗体分泌效果。

HybriMore拥有实验资讯支持

在细胞融合后，添加HybriMore培养杂交瘤细胞，平均一盘96孔盘可以提高至1000～1500个NS/1融合细胞存活，比起一般培养液进行培养可以增加到10倍以上细胞数目，如图2所示。

图2：HybriMore杂交瘤促进生长因子可以大幅提升融合后杂交瘤细胞数目。

使用HybriMore^TM杂交瘤促进生长因子进行单株化，每一盘细胞约有90-96个细胞存活，换句话说，单株化成功率接近100%，但是使用一般牛血清培养液或是FeederLayer培养单柱化存活率分别为10～40%和50～80%，失败率极高，如图3所示。

图3：HybriMore杂交瘤促进生长因子能增加单株化融合瘤细胞存活率。

杂交瘤细胞（antihumantransferrin,L3B5）分别以FCS培养基、Feederlayer与HybriMore进行培养，结果显示显示HybriMore不会降低杂交瘤细胞生产抗体的能力，如图4所示。

图4：HybriMore杂交瘤促进生长因子不会对杂交瘤细胞分泌抗体量产生影响且。

HybriMore配置容易，每瓶可回溶于1公升培养液

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