苏州蚂蚁淘生物科技有限公司成立于2017年，致力于将全球领先的创新产品和前沿技术带入中国，帮助国内科研工作者在第一时间接触世界范围内的技术革命，并分享研发工具的进步带来的技术红利。依托于集团公司深厚的资源和超过400家的国内优质客户群体，生命科学领域的一站式供应链体系，以及高风险生物危险材料进出口平台的优势，蚂蚁淘生物严格筛选国际创新且经过同行验证过的产品和技术，引入中国市场，开发、孵育和推广。公司的未来将立足于实验室大数据整合和电子商务，结合严格的品牌筛选、创新的营销模式、专注的应用支持和坚实服务，帮助实现生命科学产业链的简单和高效。

专利基本信息

申请号	CN201710442989.5	申请日	2017-06-13
公开（公告）号	CN107385014A	公开（公告）日	2017-11-24
申请公布号	CN107385014A	申请公布日	2017-11-24
分类号	C12Q1/68(2006.01)I	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程
发明人	苟德明;牛燕琴;康康	申请（专利权）人	深圳大学
代理机构	广州番禺容大专利代理事务所（普通合伙）	代理人	刘新年
地址	518060广东省深圳市南山区南海大道3688号粤海门广场A207
摘要	本发明涉及生物医学领域，具体涉及一种不需提取核酸，直接检测血清或血浆中循环microRNA(miRNA)的实时荧光定量RT‑qPCR方法。所述方法包括：S1：裂解血清或血浆中的外泌体及miRNA蛋白复合体，离心后得到循环miRNA粗提物；S2：miRNA加尾及逆转录；S3：RT‑qPCR定量检测。本发明miRNA直接荧光定量RT‑qPCR扩增方法[Direct S‑Poly(T)Plus,简称DSPP]中，不需要提取核酸，且miRNA的Poly(A)加尾和逆转录将在一个反应体系中同步完成，操作简便，缩短时间，可在95分钟内完成cDNA的制备。该技术体系灵敏度与stem‑loop方法相比提高数十甚至上百倍，建立了一种非常简便、灵敏、高效、快捷、廉价的miRNA检测的技术体系。该技术体系尤其适合于临床应用推广及其从miRNA丰度较低的生物体液样本中检测miRNA。

一、Klentaq1/KlentaqLA?

实例1：用KelntaqLA扩增大于20kb的大片段基因。
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二、高耐受性(Inhibitor-Resistant)聚合酶：OmniTaq/OmniKlentaq
产品特征：
1.对全血、血清、血浆、土壤、植物、巧克力、奶酪和牛奶中的抑制因子具极高的耐受性，可直接对样品进行PCR检测，无需进行DNA分离纯化。
2.可以耐受高达40%的全血，20%的血浆或血清，已应用于多种遗传病的分子诊断和临床检验。
3.可用于法医、环境监测、农业、动植物检疫和临床诊断等领域。
4.可以从人血液中一步扩增疟疾基因。
5.与PCR增强剂结合使用时，其耐受性将进一步提高。
6.使用Omni酶不仅节省时间、降低成本，而且实现了从微量样品中的扩增，避免因提取过程所致的DNA丢失或污染。

实例2：用OmniTaq（OT）和OmniKlentaq（OKT）从肝素抗凝血液中一步扩增乙肝病毒基因。
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实例3：用新突变的Omni酶从富含腐殖酸的人基因组中扩增1.1kb的CCR5基因。
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实例4：用新突变的Omni酶从巧克力和黑胡椒中直接扩增基因。

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三、热启动聚合酶(Hot-start)聚合酶：CesiumTaq/CesiumKlentaq
产品特征：
1.CesiumTaq和CesiumKlentaq是一种冷敏感的突变体，在室温条件下聚合酶的活性很低，当升高温度进入PCR循环时聚合酶的活性就全部释放出来，因而具有内置式热启动功能。
2.与现有化学修饰或抗体封阻的热启动聚合酶相比，CesiumTaq和CesiumKlentaq的聚合酶活性更高，扩增效果更好。
3.CesiumKlentaq具有热启动和高耐受性双重效果。

实例5：用CesiumKlentaq扩增基因热启动效果比较

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四、PCR增强剂（PCRenhancingcocktails,PEC）
产品特征：
1.联合使用PEC-1或PEC-2与高耐受性Taq酶（OmniTaqandOmniKlentaq）可以更好的克服样品中各种物质对PCR反应的抑制作用，进一步提高PCR扩增效率，简化PCR操作流程提高。
2.PEC有助于从基因组中扩增GC含量高达80%的基因。
3.PEC也可用于qPCR（SYBR和Taqmanprobe）。
4.新研发的PCR增强剂PEC-3andPEC-4有助于从食品中扩增基因。

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实例6：联合使用OmniTaqorOmniKlentaq及PCR增强剂（PEC）从不同类型的牛奶中检测沙门氏杆菌Inv基因。
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实例7：联合使用OmniTaqorOmniKlentaq及PCR增强剂（PEC）从人的基因组DNA或全血中直接扩增3个高GC含量的基因。
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五、各种特异性一步PCR试剂盒
VitaNaviTech公司开发了系列一步法PCR和qPCR试剂盒，可以直接从样品中扩增目的基因。

1.DirectBloodPCRKit：从血液中直接扩增目的基因

实例8：使用DirectBloodPCRKit从全血中一步扩增CCR5基因

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